氯化钴诱导低氧环境对人肝癌HepG2细胞株的生长代谢影响

发布时间：2017-07-17 22:16

  本文关键词：氯化钴诱导低氧环境对人肝癌HepG2细胞株的生长代谢影响

  更多相关文章： 氯化钴 肝癌 低氧 人肝癌HepG2细胞株 生长代谢

【摘要】：1、 目的建立人肝癌HepG2细胞在氯化钴诱导的低氧环境下的生长模型,观察不同浓度氯化钴诱导的低氧环境对人肝癌HepG2细胞的增殖、细胞的周期与凋亡即细胞的生长状况影响,进而探讨氯化钴诱导的低氧对人肝癌HepG2细胞的生长代谢的作用机制,并进一步探讨肿瘤细胞对低氧环境耐受性变化,为临床上对肿瘤化疗治疗的疗效寻找理论依据。2、 方法对数期人肝癌细胞株HepG2细胞,随机分组对照组,不同浓度(50μm/L、100μm/L、 150μm/L、200μm/L) Cocl2实验组,通过MTT法检测HepG2细胞增殖情况计算细胞的抑制率并绘制HepG2细胞生长抑制曲线；划痕实验观察HepG 2细胞的迁移能力；通过流式细胞仪的Annexin-V FITC/PI双染法和PI单染法检测细胞的凋亡和周期变化；通过Western Blot法检测HepG2细胞的3-磷酸甘油醛脱氢酶(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、Bcl-2蛋白的表达。3、 结果1.通过MTT法检测结果示在一定的时间和浓度范围内Cocl2抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,并呈时间-剂量依赖性关系,即细胞的增值率随着Cocl2浓度的增加和作用时间的延长逐渐减低。2. HepG2细胞经过划痕损伤试验后,实验组的细胞的迁移能力显著变慢,对照组在经过划痕实验24h后,细胞已基本迁移至划痕的中央,而实验组随着氯化钻浓度的增加,细胞划痕损伤面积未见明显减少,划痕明显,说明氯化钴抑制HepG2细胞的迁移及损伤修复能力,呈浓度依赖性关系。3.流式细胞仪的检测结果显示：对照组、不同浓度(50μm/L、100μm/L、200μm/L、 300μm/L、500μm/L)的实验组的细胞凋亡率(%)分别是：3.42、7.74、13.07、20.56、28.53、44.45(P0.05),与对照组相比较试验组的凋亡率明显增加,并呈浓度依赖性。细胞的周期结果显示实验组的HepG2细胞随着氯化钴浓度的增加,处于细胞周期G。期的比例(%)由30.51增加到68.10,都高于对照组比例(%)的28.38；而S期比例则从42.51降低到17.58,都低于42.91的对照组比例(%),说明氯化钴能明显抑制HepG2细胞周期的变化,阻滞细胞周期于G1期,从而抑制细胞的增殖。4. Western Blot法检测：与对照组相比,经过不同浓度氯化钻处理后的实验组Bcl-2蛋白的表达明显减少。4、 结论在一定范围内,Cocl2诱导的低氧环境可以抑制人肝癌HepG2细胞的增殖以及愈合迁移的作用,诱导细胞凋亡并呈时间-剂量的依赖性关系,其作用机制可能与Bcl-2蛋白的表达减少有关。
【关键词】：氯化钴 肝癌 低氧 人肝癌HepG2细胞株 生长代谢
【学位授予单位】：扬州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.7
【目录】：

• 中文摘要2-4
• 英文摘要4-7
• 缩略词表7-8
• 前言8-10
• 第一部分 氯化钴诱导的低氧环境对人肝癌HepG2细胞增殖、迁移愈合能力的影响10-16
• 1 材料及方法10-11
• 2 结果11-15
• 3 小结15-16
• 第二部分 氯化钴诱导的低氧环境对人肝癌HepG2细胞周期、凋亡和Bcl-2蛋白表达的影响16-24
• 1 材料及方法16-18
• 2 结果18-22
• 3 讨论22-23
• 4 小结23-24
• 参考文献24-26
• 综述26-30
• 参考文献29-30
• 攻读学位期间发表的论文目录30-31
• 致谢31-32

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 王其;陈孝平;关剑;张万广;张必翔;;脂质过氧化物酶体增殖物激活受体α在人肝癌多药耐药中的作用[J];中华普通外科杂志;2006年02期

2 曾纪晓;何晓顺;马毅;;雷帕霉素对人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用[J];中华实验外科杂志;2007年12期

3 姜丹丹;杨生生;陈欢;陈松;郝强;陈励藻;蔡在龙;;siRNA干扰ski基因的表达对人肝癌HepG2细胞生物学功能的影响[J];第二军医大学学报;2008年09期

4 赵刚;张洪义;温冬青;孔亚林;李宇;;实时荧光定量PCR检测人肝癌组织皮层肌动蛋白基因[J];军医进修学院学报;2010年02期

5 孔连宝,钱建民,王学浩,张峰,李相成;老年人肝癌66例手术治疗分析[J];南京医科大学学报;2000年06期

6 李祺福,欧阳高亮,刘庆榕,洪水根;中国鲎鲎素诱导人肝癌SMMC-7721细胞分化的观察[J];癌症;2002年05期

7 李玉,刘洁,崔泽实,王宁,阎英;人肝癌裸鼠移植模型阿霉素诱导法建立肝癌多药耐药细胞系[J];中国医科大学学报;2004年05期

8 王宇;韩丽娟;;表没食子儿茶素没食子酸酯诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的实验研究[J];长治医学院学报;2007年04期

9 汤钊猷,刘康达,薛琼,高冬梅,余业勤,周信达,马曾辰;裸小鼠原位移植建立人肝癌高转移模型[J];中华肿瘤杂志;1996年02期

10 林国跃，陈朝伦，吕才模，王俊，黎音，，平小佳，王锐;少数民族和汉族人肝癌遗传及环境因素与癌基因突变相关[J];中华肝脏病杂志;1998年02期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 苏金华;陈瑞川;欧阳高亮;;Isoverbascoside对人肝癌SMMC-7721细胞形态和超微结构的影响[A];中国动物学会全国显微与亚显微形态科学分会第十次形态科学与显微注射技术学术研讨会论文摘要集[C];2000年

2 王念跃;赵伟;端木浩;李勇;黄宇峰;;人肝癌组织特异性γ-谷氨酰转移酶分离纯化[A];第五届全国肝脏疾病临床暨中华肝脏病杂志成立十周年学术会议论文汇编[C];2006年

3 刘志;程木华;李建;;β射线辐射对人肝癌HepG2细胞的生物学效应[A];中华医学会第九次全国核医学学术会议论文摘要汇编[C];2011年

4 丁兆习;刘执玉;毕于顺;孟海伟;李贵宝;宋涛;;血管内皮生长因子C在人肝癌组织中的表达及意义[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年

5 李媛;董蕾;;酪酪肽对荷人肝癌裸小鼠皮下移植瘤的影响[A];中华医学会第七次全国消化病学术会议论文汇编（下册）[C];2007年

6 杨守京;胡沛臻;刘雁萍;王小平;李静;崔崇伟;刘彦仿;王彩云;马福成;;人肝癌中的热休克蛋白及其用于肝癌免疫基因治疗的实验研究[A];中华医学会病理学分会2005年学术年会论文汇编[C];2005年

7 汤绍辉;杨冬华;黄卫;周e

本文编号：554872