顺铂通过激活自噬信号通路抑制乳腺癌细胞生长的机制研究

发布时间：2017-07-18 08:12

  本文关键词：顺铂通过激活自噬信号通路抑制乳腺癌细胞生长的机制研究

  更多相关文章： 自噬 顺铂 化疗 乳腺癌

【摘要】：目的:自噬(Autophagy)被称为Ⅱ型细胞程序性死亡(programmed cell death,PCD)。化疗是乳腺癌的主要治疗手段之一,然而自噬是否参与其中,目前尚不完全清楚。本研究拟探讨化疗药物是否能通过自噬途径抑制乳腺癌细胞的生长。方法:1.表阿霉素(EPI)、甲氨蝶呤(MTX)、环磷酰胺(CTX)、顺铂(DDP)处理乳腺癌细胞后,检测其增殖能力、细胞周期、自噬相关基因m RNA的表达。2.建立稳定表达Ds Red-LC3细胞株,分别用表阿霉素(EPI)、甲氨蝶呤(MTX),环磷酰胺(CTX)、顺铂(DDP)处理,检测自噬小体的形成。3.通过自噬抑制剂(3-methyladenine,3-MA)阻断自噬通路,再用表阿霉素(EPI)、甲氨蝶呤(MTX)、环磷酰胺(CTX)、顺铂(DDP)处理乳腺癌细胞,检测其增殖能力。4.分别用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)、流式细胞术、实时荧光定量PCR、荧光显微镜检测乳腺癌细胞的增殖能力、细胞周期、自噬基因m RNA的表达水平、自噬体形成。结果:1.表阿霉素,甲氨蝶呤,环磷酰胺和顺铂抑制乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MDA-MB-453细胞增殖能力,并呈剂量和时间依赖效应。2.表阿霉素,甲氨蝶呤,环磷酰胺和顺铂中,仅顺铂可以诱导乳腺癌细胞MDA-MB-231和MDA-MB-453发生自噬。3.自噬抑制剂(3-methyladenine,3-MA)处理后,可削弱顺铂对乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MDA-MB-453抑制增殖的能力,而对表阿霉素,甲氨蝶呤和环磷酰胺的抑生长作用无明显影响。4.顺铂诱导乳腺癌细胞发生G2/M细胞周期阻滞。自噬抑制剂(3-methyladenine,3-MA)不能削弱化疗药物对细胞周期的影响。5. m RNA AMBRA1ATG3 ATG4 C ATG4D,ATG5,,ATG7,ATG13,ATG14,ATG16L2,,Beclin 1,,DRAM1,GABARAP, GABARAPL1,GABARAPL2,HDAC6,IRGM,MAP1LC3 B 和 ULK1。结论:本研究证实表阿霉素,甲氨蝶呤,环磷酰胺和顺铂对乳腺癌细胞的增殖有抑制作用,并呈时间与剂量依赖性;其中只有顺铂可以诱导乳腺癌细胞自噬。顺铂通过上调了自噬相关基因的表达,诱导乳腺癌细胞自噬,进而导致G2/M期阻滞,从而抑制细胞的增殖。
【关键词】：自噬 顺铂 化疗 乳腺癌
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.9
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 引言9-10
• 材料与方法10-18
• 结果18-27
• 讨论27-31
• 结论31-32
• 参考文献32-37
• 综述 自噬在肿瘤形成和进展中的作用37-50
• 参考文献43-50
• 中英文对照缩略词表50-52
• 攻读学位期间公开发表的论文52-53
• 致谢53-55

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本文编号：556753