SiRNA沉默FGFR3基因表达对肺癌A549细胞侵袭性的影响

发布时间：2017-08-03 15:16

  本文关键词：SiRNA沉默FGFR3基因表达对肺癌A549细胞侵袭性的影响

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【摘要】：目的探讨人成纤维细胞生长因子3(Fibroblast growth factor3,FGFR3)基因沉默对人类肺腺癌A549细胞侵袭能力及其对基质金属蛋白酶9(Matrix metaloproteinases 9,MMP9)及基因表达的影响。方法细胞分为3组:A组:实验组,即FGFR3特异性小干扰RNA(Small interfering RNA,siRNA)(siRNA-FGFR3)干扰组;B组:阴性对照组,即FGFR3非特异性阴性对照siRNA(si RNA-NC)干扰组;C组:空白对照组,无siRNA干扰;通过核酸转染试剂脂质体LipofectamineTM2000(Lipo2000)转染A549细胞;倒置荧光显微镜观察Lipo2000转染效率;转染后A549细胞的侵袭能力用Transwell实验检测;实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-time PCR)用于检测转染前后FGFR3及MMP9 m RNA的表达水平;蛋白质印迹法(Western blot)检测转染前后FGFR3及MMP9蛋白质表达水平。结果Lipo2000介导的FAM-siRNA对肺腺癌A549细胞的转染效率可达80%;在转染36 h后,Transwell实验结果显示A组较B组、C组侵袭能力显著降低(P0.01)。Real-time PCR结果显示,A组较B、C组的FGFR3和MMP9基因表达量明显下调(P0.01)。Western blot结果显示,A组较B、C组的FGFR3和MMP9蛋白表达量明显下调(P0.01)。结论FGFR3基因沉默可明显抑制肺腺癌A549细胞的侵袭能力,并能下调MMP9表达。本实验为肺癌的治疗提供了新的治疗靶点。
【关键词】：肺癌 MMP9 RNA干扰 siRNA FGFR3
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R734.2
【目录】：

• 摘要2-3
• Abstract3-5
• 引言5-6
• 第一章 实验材料6-8
• 1.1 细胞株6
• 1.2 实验仪器6-7
• 1.3 实验试剂7-8
• 第二章 实验方法与步骤8-10
• 2.1 细胞培养8
• 2.2 细胞的转染与实验分组8
• 2.3 观察转染效率8
• 2.4 Transwell实验检测A549细胞的侵袭能力8-9
• 2.6 Real-time PCR检测A549细胞FGFR3及MMP9 mRNA的表达9
• 2.7 Western blot检测A549细胞FGFR3及MMP9蛋白的表达9-10
• 2.8 统计学分析10
• 第三章 实验结果10-14
• 3.1 脂质体Lipo2000介导的FAM-siRNA对肺癌细胞A549的转染效率的观察10-11
• 3.2 siRNAFGFR3沉默FGFR3表达抑制A549细胞侵袭力11
• 3.3 siRNA-FGFR3转染A549细胞对FGFR3、MMP9mRNA表达的影响11-12
• 3.4 siRNA-FGFR3转染A549细胞对FGFR3、MMP9蛋白表达的影响12-14
• 第四章 讨论14-15
• 第五章 结论15-16
• 参考文献16-18
• 综述18-41
• 综述参考文献27-41
• 学位期间的研究成果41-42
• 致谢42-43

【共引文献】

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1 石岳泉;杨向红;;非小细胞肺癌的驱动基因及其临床意义[J];中国肺癌杂志;2014年06期

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3 王旭洲;陈炜生;余英豪;;非小细胞肺癌患者EML4-ALK融合基因突变研究[J];中国肺癌杂志;2015年02期

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5 Peter B.Alexander;Xiao-Fan Wang;;Resistance to receptor tyrosine kinase inhibition in cancer:molecular mechanisms and therapeutic strategies[J];Frontiers of Medicine;2015年02期

6 Sha Fu;Hai?Yun Wang;Fang Wang;Ma?Yan Huang;Ling Deng;Xiao Zhang;Zu?Lu Ye;Jian?Yong Shao;;Clinicopathologic characteristics and therapeutic responses of Chinese patients with non-small cell lung cancer who harbor an anaplastic lymphoma kinase rearrangement[J];Chinese Journal of Cancer;2015年09期

7 韩振中;;非小细胞肺癌患者EML4-ALK融合基因检测及其临床特征分析[J];福建医药杂志;2016年01期

8 杨清海;陈惠玲;郑智勇;;肺腺癌临床病理研究新进展[J];临床与实验病理学杂志;2014年01期

9 彭全洲;陈灼怀;王晓玫;左敏;刘汉勇;胡锦涛;成志强;;腹腔上皮样炎性肌纤维母细胞肉瘤2例临床病理观察[J];临床与实验病理学杂志;2015年05期

10 王杰;衣素琴;王欢;周s，

本文编号：614992