IRE1在结肠癌的表达及临床意义

发布时间：2017-08-03 15:28

  本文关键词：IRE1在结肠癌的表达及临床意义

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【摘要】：目的系统地探讨IRE1α-XBP1、IRE1β和MUC2在结肠癌及其相应正常组织中的表达情况,并分析其与结肠癌临床分期、病理分级和侵袭转移等临床特性的关系及意义。方法选择2013年9月至2014年2月于河南科技大学第一附属医院收集的手术切除和/或内镜下活检结肠癌组织及距离病变组织5cm以上正常结肠组织35例,采用免疫组织化学法、蛋白印迹法(Western Blot)检测IRE1α、IRE1β和MUC2蛋白的表达情况;实时定量PCR技术(RT-PCR)检测IRE1α-XBP1、IRE1β和MUC2 mRNA的表达情况,并结合临床病理特征,如有无淋巴结转移、肿瘤分化程度、肿瘤TNM分期以及患者的性别、年龄及吸烟等,分析它们的表达与结肠癌组织病理特征和患者临床特性之间的关系。应用SPSS17.0统计软件进行统计学分析。结果1.免疫组化结果显示结肠上皮细胞中IRE1β阳性表达为棕黄色颗粒,主要定位于细胞质。相比之下,IRE1β在35例结肠癌组织中表达显著降低(P0.05)。IRE1α阳性表达为棕黄色颗粒,与IRE1β相同,主要定位于胞质。IRE1α在35例结肠癌组织表达量与正常结肠组织相比无明显变化。MUC2在结肠癌组织中的表达量显著低于正常结肠组织(P0.05)。其中,IRE1β的表达水平与患者淋巴结转移、临床分期、肿瘤分化程度有关,且随着患者临床分期增加而逐渐增高(P0.05),但与患者的性别及年龄均无关。IRE1α、MUC2与患者临床病理特征均无关;2.Western Blot结果显示与免疫组化结果一致,与正常结肠组织相比,IRE1β蛋白在结肠癌组织中表达显著降低(P0.05)。而IRE1α蛋白在结肠癌组织表达量与正常结肠组织相比无明显变化;3.RT-PCR结果显示与蛋白表达一致,IRE1β、MUC2 m RNA在结肠癌患者癌组织中的表达低于正常结肠组织(P0.05)。其中,正常结肠组织IRE1β和MUC2 mRNA的表达量分别是肿瘤组织的2.1倍和4.5倍。同时,结肠癌组织IRE1βmRNA表达水平的降低程度与疾病临床分期、淋巴结转移和肿瘤分化程度相关,MUC2 mRNA的表达水平与患者是否吸烟有关。IRE1αmRNA、XBP1mRNA在结肠癌中表达水平与正常结肠组织无显著差异;4.在相关性分析中,IRE1β与MUC2表达呈正相关。结论1.结肠癌患者癌组织中IRE1β蛋白和mRNA表达降低。IRE1β的表达与疾病临床分期、淋巴结转移和肿瘤分化程度相关,提示IRE1β可能参与结肠癌的发生、发展,并与结肠癌的浸润和转移有关;2.结肠癌患者癌组织中IRE1α、XBP1蛋白和m RNA的表达,与正常结肠组织相比无显著差异,提示IRE1α-XBP1通路可能不参与结肠癌的发生、发展;3.在相关性分析中,IRE1β与MUC2呈正相关,提示IRE1β在MUC2表达过程中起到一定作用,两者可能均在结肠癌病理发展中发挥作用。
【关键词】：肌醇需求酶1 结肠癌 内质网应激 未折叠蛋白反应
【学位授予单位】：河南科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.35
【目录】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 第1章 绪论9-25
• 1.1 研究背景9-23
• 1.1.1 结肠癌的流行病学特征9
• 1.1.2 结肠癌的发病机制9
• 1.1.3 内质网功能9-11
• 1.1.4 内质网应激与未折叠蛋白反应11-12
• 1.1.5 未折叠蛋白反应传导通路12-17
• 1.1.6 内质网应激与凋亡17-19
• 1.1.7 内质网应激和恶性肿瘤19-22
• 1.1.8 小结22-23
• 1.2 研究目的23
• 1.3 研究意义23-25
• 第2章 材料与方法25-39
• 2.1 实验材料25-27
• 2.1.1 材料来源25
• 2.1.2 材料收集25
• 2.1.3 主要试剂25-26
• 2.1.4 主要仪器26-27
• 2.2 实验方法27-37
• 2.2.1 组织固定及切片27
• 2.2.2 免疫组化实验原理27-28
• 2.2.3 免疫组化实验步骤28
• 2.2.4 免疫组化结果判定标准28-29
• 2.2.5 Western Blot实验原理29
• 2.2.6 聚丙烯酰胺凝胶电泳原理29-30
• 2.2.7 Western Blot实验步骤30-33
• 2.2.8 引物设计33-34
• 2.2.9 PCR技术的基本原理34-35
• 2.2.10总mRNA的提取与检测35-37
• 2.3 统计学方法37-39
• 第3章 结果39-49
• 3.1 入选病人的基本情况39-40
• 3.2 免疫组化结果40-43
• 3.2.1 IRE1α 在结肠癌中的表达40
• 3.2.2 IRE1β 在结肠癌中的表达40-41
• 3.2.3 MUC2在结肠癌中的表达41-42
• 3.2.4 结肠癌组织中IRE1α、IRE1β 和MUC2的表达与临床病理特征的关系42-43
• 3.3 Western Blot 结果43-44
• 3.4 RT-PCR结果44-45
• 3.4.1 IRE1α 与XBP1 mRNA在结肠癌组织和相应正常结肠组织中的表达44
• 3.4.2 IRE1β 与MUC2 mRNA在结肠癌组织和相应正常结肠组织中的表达44
• 3.4.3 结肠癌组织中IRE1β 和MUC2 mRNA表达量与临床病理特征的关系44-45
• 3.5 相关性分析45-49
• 3.5.1 IRE1β、MUC2的蛋白与其mRNA表达水平之间的相关性分析45-46
• 3.5.2 IRE1β 和MUC2表达水平之间的相关性分析46-49
• 第4章 讨论49-53
• 4.1 IRE1α-XBP1在结肠癌及相应正常结肠组织中的表达及意义49-50
• 4.2 IRE1β 与MUC2在结肠癌及相应正常结肠组织中的表达及意义50-53
• 第5章 结论53-55
• 参考文献55-67
• 缩略语词汇表67-69
• 致谢69-71
• 攻读学位期间的研究成果71

【参考文献】

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1 曹卡加;马国胜;刘奕龙;万德森;;广州市2000～2002年大肠癌的发病率分析[J];癌症;2009年04期

2 李明,顾晋;中国结直肠癌20年来发病模式的变化趋势[J];中华胃肠外科杂志;2004年03期

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本文编号：615062