双酚A对胃癌细胞生长及侵袭影响的研究

发布时间：2017-08-08 20:29

  本文关键词：双酚A对胃癌细胞生长及侵袭影响的研究

  更多相关文章： 双酚A 胃癌 雌激素受体 生长 侵袭 MMP-9

【摘要】：目的:探讨环境内分泌干扰物双酚A(BPA)对胃癌细胞生长、侵袭的影响及机制分析。方法:本研究选用人中分化和低分化胃癌细胞株SGC-7901和MKN-45进行体外贴壁培养。选用10-10~10-4mol/L BPA处理细胞,分别在24、48、72小时观察细胞生长和形态学改变,并采用CCK-8法检测细胞增殖或抑制情况。采用Transwell侵袭实验研究BPA对胃癌细胞侵袭能力的改变,RT-PCR(逆转录聚合酶链反应)检测胃癌侵袭相关基因MMP-9 mRNA表达水平的改变。为研究雌激素受体通路和BPA诱导的胃癌细胞侵袭能力增强之间的关系,使用雌激素受体拮抗剂氟维司群(ICI 182,780)作为对照研究。结果:10-10~10-5mol/L BPA限制两种胃癌细胞生长,并且随着浓度梯度增大,细胞更趋于离散,细胞之间连接变弱、接触变少,并且10-4 mol/L BPA对细胞有毒性作用。Transwell侵袭实验中,胃癌细胞株SGC-7901:BPA组侵袭能力较对照组增强(134.60%?14.91%vs 100.00%?16.16%,p0.01,n=3),而BPA+ICI组与BPA组比较、ICI组与对照组比较差异均无统计学意义(p0.05,n=3);胃癌细胞株MKN-45:BPA组细胞侵袭能力较对照组增强(120.06%?15.19%vs100.00%?16.26%,p0.05,n=3),而BPA+ICI组与BPA组比较、ICI组与对照组比较差异均无统计学意义(p0.05,n=3)。基因研究层面,胃癌细胞株SGC-7901:与对照组比较,10-5 mol/L和10-6 mol/L BPA组MMP-9 mRNA表达增高有统计学意义(p0.05,n=3),BPA+ICI组与BPA组比较,MMP-9 mRNA表达差异无统计学意义(p0.05,n=3);胃癌细胞株MKN-45:10-5 mol/L、10-6 mol/L和10-7 mol/L BPA组与对照组比较,MMP-9 mRNA表达增高有统计学意义(p0.01,n=3)。BPA+ICI组与BPA组比较,MMP-9 m RNA表达差异无统计学意义(p0.05,n=3)。结论:在一定浓度范围内,BPA可以引起胃癌细胞生长异常改变,随着BPA浓度增大胃癌细胞侵袭能力增强,侵袭相关基因MMP-9参与了BPA诱导的胃癌细胞侵袭过程,ER通路可能未参与其中。
【关键词】：双酚A 胃癌 雌激素受体 生长 侵袭 MMP-9
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.2
【目录】：

• 摘要3-4
• Abstract4-6
• 英文缩略词6-10
• 第一章 前言10-15
• 1.1 胃癌的流行病学特点及治疗现状10
• 1.2 雌激素与胃癌的关系10-12
• 1.2.1 雌激素的作用机制11
• 1.2.2 胃癌-雌激素可能相关性肿瘤11-12
• 1.2.3 ER在胃癌的分布及作用12
• 1.3 环境内分泌干扰物双酚A（BPA）及其致瘤机制12-15
• 1.3.1 BPA概述12-13
• 1.3.2 BPA致瘤机制13-15
• 第二章 材料和方法15-23
• 2.1 实验材料15-16
• 2.1.1 胃癌细胞系15
• 2.1.2 主要实验试剂15
• 2.1.3 主要试剂配制15-16
• 2.1.4 主要实验仪器16
• 2.2 实验方法16-22
• 2.2.1 细胞复苏16-17
• 2.2.2 细胞传代17
• 2.2.3 细胞冻存17
• 2.2.4 BPA对胃癌细胞生长的影响17-18
• 2.2.5 细胞侵袭能力检测18-19
• 2.2.6 BPA对胃癌细胞MMP-9 m RNA表达的影响19-21
• 2.2.7 ICI 182,780 对胃癌细胞MMP-9 m RNA表达的影响21-22
• 2.2.8 统计学处理22
• 附 技术路线图22-23
• 第三章 结果23-33
• 3.1 BPA对胃癌细胞生长的影响23-27
• 3.1.1 SGC-7901 细胞形态学观察23
• 3.1.2 MKN-45 细胞形态学观察23
• 3.1.3 SGC-7901 细胞生长曲线23
• 3.1.4 MKN-45 细胞生长曲线23-27
• 3.2 Tranwell模型检测细胞体外侵袭能力27-30
• 3.3 RT-PCR检测细胞MMP-9 m RNA表达水平30-33
• 3.3.1 SGC-7901 中MMP-9 m RNA表达水平30
• 3.3.2 MKN-45 中MMP-9 m RNA表达水平30-33
• 第四章 讨论33-39
• 4.1 BPA改变胃癌细胞生长33-34
• 4.2 BPA促进胃癌细胞侵袭34-35
• 4.3 BPA对胃癌细胞作用机制分析35-39
• 第五章 结论39-40
• 5.1 结论39
• 5.2 研究展望39-40
• 参考文献40-48
• 附综述 双酚A及其相关性疾病的研究进展48-62
• 1. 各个生命阶段的接触源48-49
• 2. 与BPA暴露相关的疾病49-52
• 2.1 糖尿病和肥胖49
• 2.2 心脑血管疾病49
• 2.3 慢性肾病49
• 2.4 出生缺陷和发育障碍49-50
• 2.5 不孕不育50
• 2.6 慢性呼吸系统疾病50
• 2.7 癌症50-52
• 3. BPA暴露的致病机制52-55
• 3.1 基因损伤52-53
• 3.2 BPA的表观遗传学效应53
• 3.3 内分泌干扰效应53-54
• 3.4 氧化应激和线粒体功能障碍54-55
• 4. 结论和展望55
• 参考文献55-62
• 在学期间的研究成果62-63
• 致谢63

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