嗜盐芽孢杆菌冷激蛋白基因HhCsp转化拟南芥

发布时间：2024-02-15 00:46

　　冷激蛋白(Cold shock protein,Csp)作为应激蛋白几乎分布于所有原核生物当中。当细胞遭受非生物逆境胁迫时,Csp作为RNA的分子伴侣,与单链核苷酸非特异性结合,阻止mRNA二级结构的生成,避免转录和翻译终止,保证细胞的正常代谢。除此之外,Csp还作为转录激活因子,与启动子结合提高基因的转录水平。大肠杆菌(Escherichia coli)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的Csp基因已经被克隆,并验证了其功能,转化植物后能显著改良转基因植物对干旱等非生物逆境的抗性。在极端非生物逆境下生存的极端微生物,大多具有独特细胞结构和环境适应机制。嗜盐芽孢杆菌(Halobacillus halophiles)就是其中一种,它能够产生诸如Csp等多种抗性溶质,抵御高盐环境的胁迫危害。本研究在生物信息学分析的基础上,根据玉米基因组密码子偏爱性,对嗜盐芽孢杆菌Csp基因(HhCsp)进行密码子优化,构建双子叶植物表达载体,农杆菌介导法转化拟南芥,探索其异源表达改良植物耐盐耐旱等非生物逆境抗性的可能,为下一步转化玉米等作物抗逆转基因研究奠定基因基础。主要结果如下:(1)...

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【部分图文】：

图1CspA3D结构

含7个芳香族残基（W、F、F、F、F、F、Y），结合相关；另外2个带正电荷的赖氨酸残基（K10和K16）也还有两个RNA结合基序：RNP1（KGFGFI）位于β2链上，R，RNP与单链DNA和RNA非特异性结合（图2）[12-13]。V9、IIe2....

图4CspB3D结构图

图4CspB3D结构图Fig.4Three-dimendionalstructureofCspB广泛的是大肠杆菌，在其9个CspA家族成员中，。CspA缺陷性菌株，在温度骤降时，同源蛋白CCspG在冷激期间起到补偿CspA功能的作用[17,2....

图5技术路线Fig.5Technicalroute

子优化后构建双子叶植物表达载体，农杆菌介导法转化拟南芥，探索其异源表达改良植物耐盐等非生物逆境抗性的可能，为后续玉米等作物培育抗逆转基因新种质奠定基础（图5）。图5技术路线Fig.5Technicalroute

图6双子叶植物表达载体pCAMBIA2300-35S-HhCsp的构建A：带绿色荧光标记基因（eGFP）的双子叶植物组成型表达载体pCAMBIA2300-35S-eGFP；B：带限制性酶切位点SmaI和PstI的HhCsp基因

12图6双子叶植物表达载体pCAMBIA2300-35S-HhCsp的构建A：带绿色荧光标记基因（eGFP）的双子叶植物组成型表达载体pCAMBIA2300-35S-eGFP；B：带限制性酶切位点SmaI和PstI的HhCsp基因。C：双子叶植物组成型表....

本文编号：3898899