抗焦虑性抑郁症肽的制备及其作用机制
发布时间：2023-12-24 12:24
焦虑性抑郁症(Anxious depression)是一类复合型精神疾病,患者以抑郁障碍为主,同时伴有焦虑症状。神经突触间隙五羟色胺(Serotonin,5-HT)匮乏是焦虑性抑郁症发病的重要原因之一。色氨酸(Tryptophan,Trp)是5-HT合成的主要前体物质,因此,提高中枢神经系统Trp含量和生物利用度是预防和改善焦虑性抑郁症的靶点。中枢神经系统Trp含量及其可用性受到许多因素的影响:1)Trp是通过与五种大分子中性氨基酸(Five large neutral amino acid(Leu、Ile、Val、Phe、Tyr),5LNAAs)竞争转运载体的方式通过血脑屏障;2)在心理压力下可激活Trp向犬尿氨酸(Kynurenine,KYN)代谢途径转化的关键限速酶,造成Trp耗竭,降低Trp向5-HT代谢途径转化。因此,提高血浆Trp指数(Trp/5LNAAs)是增加中枢神经系统中Trp含量的关键,促进大脑Trp向5-HT代谢途径转化是增加Trp生物利用度的关键。本文以乳清蛋白为原料利用可控酶解技术制备高Trp指数水解产物(Whey protein hydrolysate wi...
【文章页数】：162 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
主要缩略词中英文对照
第一章 绪论
1.1 引言
1.2 焦虑性抑郁症的研究现状
1.2.1 焦虑性抑郁症的发病机制
1.2.2 焦虑性抑郁症的临床用药及其作用机制
1.2.3 抑郁症动物模型研究进展
1.2.4 焦虑症动物模型研究进展
1.2.5 焦虑性抑郁症动物模型研究进展
1.2.6 行为学评价研究进展
1.3 五羟色胺能神经系统研究进展
1.3.1 五羟色胺能神经元分布
1.3.2 神经递质5-HT
1.3.3 Trp利用度与5-HT合成
1.4 高色氨酸膳食补充剂研究进展
1.5 生物活性肽研究现状
1.5.1 酶法合成γ-谷氨酰肽研究进展
1.5.2 酶法水解生物活性肽研究进展
1.6 本课题研究的立题依据和主要内容
1.6.1 立题依据
1.6.2 主要研究内容
1.6.3 技术路线
第二章 色氨酸肽制备及其制备条件优化的研究
2.1 引言
2.2 材料与仪器
2.2.1 实验材料
2.2.2 主要仪器设备
2.3 实验方法
2.3.1 EW的合成及分析
2.3.2 乳清蛋白制备
2.3.3 乳清蛋白水解产物制备研究
2.3.4 四种蛋白酶水解产物Trp指数测定
2.3.5 乳清蛋白高Trp指数水解产物中Trp肽结构鉴定
2.3.6 数据分析
2.4 结果与讨论
2.4.1 EW总转化率和结构鉴定
2.4.2 四种蛋白酶对乳清蛋白水解度的影响
2.4.3 四种蛋白酶水解时间对乳清蛋白水解产物Trp指数的影响
2.4.4 四种蛋白酶水解产物中Trp指数测定
2.4.5 胰蛋白酶水解产物中Trp肽序列和结构鉴定
2.5 本章小结
第三章 色氨酸肽抗氧化活性及对斑马鱼5-HT分泌的研究
3.1 引言
3.2 材料与仪器
3.2.1 实验材料
3.2.2 主要仪器设备
3.3 实验方法
3.3.1 EW的合成
3.3.2 WPH的制备方法
3.3.3 EW和WPH对DPPH自由基清除活性研究
3.3.4 EW和WPH金属离子螯合活性研究
3.3.5 EW和WPH清除O2
·-活性研究
3.3.6 EW和WPH总抗氧化活性的研究
3.3.7 斑马鱼对11种供试品的最大耐受浓度(MTC)测定
3.3.8 EW和WPH对斑马鱼Trp浓度的影响
3.3.9 EW和WPH对斑马鱼TPH活性和5-HT水平的影响
3.3.10 数据分析
3.4 结果与讨论
3.4.1 EW和WPH抗氧化活性研究
3.4.2 EW和WPH对斑马鱼体重增加值的影响
3.4.3 EW和WPH对斑马鱼Trp浓度的影响
3.4.4 EW和WPH对斑马鱼TPH活性的影响
3.4.5 EW和WPH对斑马鱼5-HT水平的影响
3.4.6 相关性分析和线性回归分析
3.5 本章小结
第四章 色氨酸肽对焦虑性抑郁症小鼠行为学及5-HT神经递质的影响
4.1 引言
4.2 材料与仪器
4.2.1 实验材料
4.2.2 主要仪器设备
4.3 实验方法
4.3.1 焦虑性抑郁症动物模型建立
4.3.2 动物分组及处理
4.3.3 强迫游泳实验
4.3.4 旷场实验
4.3.5 高架十字迷宫实验
4.3.6 小鼠体重采集
4.3.7 WPH和EW对大脑组织5-HT水平的影响
4.3.8 数据分析
4.4 结果与讨论
4.4.1 WPH和EW对小鼠日常活动和体重的影响
4.4.2 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠强迫游泳行为的影响
4.4.3 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠旷场行为的影响
4.4.4 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠高架十字迷宫行为的影响
4.4.5 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠脑组织中5-HT水平的影响
4.5 本章小结
第五章 色氨酸肽通过对炎症因子的干预作用来下调KYN代谢途径的研究
5.1 引言
5.2 材料与仪器
5.2.1 主要仪器设备
5.2.2 实验材料
5.3 实验方法
5.3.1 WPH和EW对血清炎症因子水平的影响
5.3.2 WPH和EW对大脑组织IDO酶和TPH酶活性的影响
5.3.3 WPH和EW对肝脏组织TDO酶活性的影响
5.3.4 WPH和EW对Trp代谢途径的影响
5.3.5 数据分析
5.4 结果与讨论
5.4.1 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠炎症因子的干预作用
5.4.2 WPH和EW对大脑组织IDO和TPH酶活性的影响
5.4.3 WPH和EW对肝脏TDO酶活性的影响
5.4.4 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠5-HT代谢途径的影响
5.4.5 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠KYN代谢途径的影响
5.4.6 炎症因子与IDO酶活性相关性及线性回归分析
5.5 本章小结
第六章 色氨酸肽对焦虑性抑郁症小鼠的神经保护作用及其机制研究
6.1 引言
6.2 材料与仪器
6.2.1 实验材料
6.2.2 主要仪器设备
6.3 实验方法
6.3.1 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠大脑组织的抗氧化作用
6.3.2 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠血浆HPA轴分泌的影响
6.3.3 海马和下丘脑的组织病理学观察(H&E染色)
6.3.4 海马总RNA的提取
6.3.5 cDNA制备和实时荧光定量PCR
6.3.6 数据分析
6.4 结果与讨论
6.4.1 WPH和EW对海马和下丘脑抗氧化生物标志物的影响
6.4.2 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠血浆HPA轴分泌的影响
6.4.3 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠海马CA3区组织病理学的影响
6.4.4 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠下丘脑组织病理学的影响
6.4.5 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠BDNF/TrkB信号通路的影响
6.4.6 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠改善的可能作用机制
6.5 本章小结
结论与展望
1.结论
2.论文创新点
3.展望
参考文献
附录
攻读博士学位期间取得的研究成果
致谢
附件
本文编号：3874503
【文章页数】：162 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
主要缩略词中英文对照
第一章 绪论
1.1 引言
1.2 焦虑性抑郁症的研究现状
1.2.1 焦虑性抑郁症的发病机制
1.2.2 焦虑性抑郁症的临床用药及其作用机制
1.2.3 抑郁症动物模型研究进展
1.2.4 焦虑症动物模型研究进展
1.2.5 焦虑性抑郁症动物模型研究进展
1.2.6 行为学评价研究进展
1.3 五羟色胺能神经系统研究进展
1.3.1 五羟色胺能神经元分布
1.3.2 神经递质5-HT
1.3.3 Trp利用度与5-HT合成
1.4 高色氨酸膳食补充剂研究进展
1.5 生物活性肽研究现状
1.5.1 酶法合成γ-谷氨酰肽研究进展
1.5.2 酶法水解生物活性肽研究进展
1.6 本课题研究的立题依据和主要内容
1.6.1 立题依据
1.6.2 主要研究内容
1.6.3 技术路线
第二章 色氨酸肽制备及其制备条件优化的研究
2.1 引言
2.2 材料与仪器
2.2.1 实验材料
2.2.2 主要仪器设备
2.3 实验方法
2.3.1 EW的合成及分析
2.3.2 乳清蛋白制备
2.3.3 乳清蛋白水解产物制备研究
2.3.4 四种蛋白酶水解产物Trp指数测定
2.3.5 乳清蛋白高Trp指数水解产物中Trp肽结构鉴定
2.3.6 数据分析
2.4 结果与讨论
2.4.1 EW总转化率和结构鉴定
2.4.2 四种蛋白酶对乳清蛋白水解度的影响
2.4.3 四种蛋白酶水解时间对乳清蛋白水解产物Trp指数的影响
2.4.4 四种蛋白酶水解产物中Trp指数测定
2.4.5 胰蛋白酶水解产物中Trp肽序列和结构鉴定
2.5 本章小结
第三章 色氨酸肽抗氧化活性及对斑马鱼5-HT分泌的研究
3.1 引言
3.2 材料与仪器
3.2.1 实验材料
3.2.2 主要仪器设备
3.3 实验方法
3.3.1 EW的合成
3.3.2 WPH的制备方法
3.3.3 EW和WPH对DPPH自由基清除活性研究
3.3.4 EW和WPH金属离子螯合活性研究
3.3.5 EW和WPH清除O2
·-活性研究
3.3.6 EW和WPH总抗氧化活性的研究
3.3.7 斑马鱼对11种供试品的最大耐受浓度(MTC)测定
3.3.8 EW和WPH对斑马鱼Trp浓度的影响
3.3.9 EW和WPH对斑马鱼TPH活性和5-HT水平的影响
3.3.10 数据分析
3.4 结果与讨论
3.4.1 EW和WPH抗氧化活性研究
3.4.2 EW和WPH对斑马鱼体重增加值的影响
3.4.3 EW和WPH对斑马鱼Trp浓度的影响
3.4.4 EW和WPH对斑马鱼TPH活性的影响
3.4.5 EW和WPH对斑马鱼5-HT水平的影响
3.4.6 相关性分析和线性回归分析
3.5 本章小结
第四章 色氨酸肽对焦虑性抑郁症小鼠行为学及5-HT神经递质的影响
4.1 引言
4.2 材料与仪器
4.2.1 实验材料
4.2.2 主要仪器设备
4.3 实验方法
4.3.1 焦虑性抑郁症动物模型建立
4.3.2 动物分组及处理
4.3.3 强迫游泳实验
4.3.4 旷场实验
4.3.5 高架十字迷宫实验
4.3.6 小鼠体重采集
4.3.7 WPH和EW对大脑组织5-HT水平的影响
4.3.8 数据分析
4.4 结果与讨论
4.4.1 WPH和EW对小鼠日常活动和体重的影响
4.4.2 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠强迫游泳行为的影响
4.4.3 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠旷场行为的影响
4.4.4 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠高架十字迷宫行为的影响
4.4.5 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠脑组织中5-HT水平的影响
4.5 本章小结
第五章 色氨酸肽通过对炎症因子的干预作用来下调KYN代谢途径的研究
5.1 引言
5.2 材料与仪器
5.2.1 主要仪器设备
5.2.2 实验材料
5.3 实验方法
5.3.1 WPH和EW对血清炎症因子水平的影响
5.3.2 WPH和EW对大脑组织IDO酶和TPH酶活性的影响
5.3.3 WPH和EW对肝脏组织TDO酶活性的影响
5.3.4 WPH和EW对Trp代谢途径的影响
5.3.5 数据分析
5.4 结果与讨论
5.4.1 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠炎症因子的干预作用
5.4.2 WPH和EW对大脑组织IDO和TPH酶活性的影响
5.4.3 WPH和EW对肝脏TDO酶活性的影响
5.4.4 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠5-HT代谢途径的影响
5.4.5 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠KYN代谢途径的影响
5.4.6 炎症因子与IDO酶活性相关性及线性回归分析
5.5 本章小结
第六章 色氨酸肽对焦虑性抑郁症小鼠的神经保护作用及其机制研究
6.1 引言
6.2 材料与仪器
6.2.1 实验材料
6.2.2 主要仪器设备
6.3 实验方法
6.3.1 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠大脑组织的抗氧化作用
6.3.2 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠血浆HPA轴分泌的影响
6.3.3 海马和下丘脑的组织病理学观察(H&E染色)
6.3.4 海马总RNA的提取
6.3.5 cDNA制备和实时荧光定量PCR
6.3.6 数据分析
6.4 结果与讨论
6.4.1 WPH和EW对海马和下丘脑抗氧化生物标志物的影响
6.4.2 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠血浆HPA轴分泌的影响
6.4.3 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠海马CA3区组织病理学的影响
6.4.4 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠下丘脑组织病理学的影响
6.4.5 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠BDNF/TrkB信号通路的影响
6.4.6 WPH和EW对焦虑性抑郁症小鼠改善的可能作用机制
6.5 本章小结
结论与展望
1.结论
2.论文创新点
3.展望
参考文献
附录
攻读博士学位期间取得的研究成果
致谢
附件
本文编号：3874503
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