豆清多肽发酵液不同超滤组分抗氧化及抑菌活性
发布时间：2021-11-12 17:36
为探究豆清液中不同分子质量豆清多肽的体外抗氧化能力及抑菌效果,通过混合乳酸菌发酵的方式制备豆清多肽发酵液,通过超滤的方式,用截留相对分子质量为10 kDa, 5 kDa, 3 kDa和800 Da的超滤膜,将豆清多肽发酵液进行分级。超滤分级后得到>10 kDa, 5～10 kDa, 3～5 kDa, 800 Da～3 kDa和<800 Da的组分。分别研究5个组分的豆清发酵多肽对DPPH自由基、ABTS自由基、OH自由基的清除效果及对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制活性,并与未发酵的不同组分豆清液进行对比。结果表明,发酵在一定程度上使各组分对3种自由基的清除活性增强,其中发酵800 Da～3 kDa的组分清除活性最强;与对照相比,发酵的样品对所选大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有较明显的抑制效果。
【文章来源】：食品工业. 2020,41(10)北大核心
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
不同超滤条件对样品DPPH清除活性表1不同超滤条件发酵与未发酵DPPH清除效果EC50值
0.01b5.06±0.03d3.75±0.02h3.52±0.01k4.46±0.00f未发酵4.58±0.02e6.80±0.01a5.13±0.04c3.69±0.03i3.94±0.04g注:不同字母表示差异显著(p＜0.05)2.2.2不同超滤组分对ABTS自由基清除效果比较2,2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐，与过二硫酸钾反应，生成绿色的ABTS自由基，在734nm处有特征吸收峰，当ABTS溶液与具有抗氧化活性的物质反应时，体系颜色降低，在734nm处的吸光度降低，由于其反应灵敏、操作简单，也经常被用作体外抗氧化活性的评定标准[23]。如图3所示，从不同超滤组分分析，在800Da~3kDa相对分子质量范围内的样品表现出较强的ABTS自由基清除活性，比同类型其他组分样品清除活性强，但同一类型（发酵和未发酵）不同超滤组分之间对ABTS清除能力强弱没有发现规律。比较同一组分发酵和未发酵超滤样品的清除活性可以得出，经过发酵部分组分的清除效果有所提高（＞10kDa，3~5kDa和＜800Da），但是5~10kDa和800Da~3kDa组分样品发酵和未发酵的EC50值没有显著差异（p＞0.05），见表2。图3不同超滤条件对样品ABTS清除活性表2不同超滤条件发酵与未发酵ABTS清除效果EC50值不同超滤膜EC50/(mg·mL-1)＞10kDa5~10kDa3~5kDa800Da~3kDa＜800Da发酵1.21±0.02e0.92±0.01f1.21±0.02e0.86±0.01g1.32±0.01d未发酵1.94±0.01a0.92±0.01f1.37±0.01c0.86±0.03g1.66±0.02b注:不同字母表示差异显著(p＜0.05)2.2.3不同超滤组分对OH自由基清除效果的比较OH自由基是生物体内最重要的活性氧自由基之一，是活性氧中对生物体毒性最强，危害最大的一种自由基，与细胞辐射损伤、肿瘤、衰老等密切相关[24-25]
作，在培养基表面垂直放上牛津杯（内短6mm、外径8mm、高10mm），轻轻加压，使其与培养基接触无空隙，在杯中加入100μL豆清多肽的不同超滤组分样品，勿使其外溢，每个样品重复3次[18]，在37℃培养箱中培养24h，观察抑菌圈大小，采用全自动菌落分析仪，测量每个培养皿中抑菌圈的直径，取平均值。无菌水作为空白对照[16-17]。1.4数据处理试验数据运用Origin9.0进行处理分析，运用SPSS软件进行统计分析，每组试验平行3次，取平均值。2结果与分析2.1发酵与未发酵SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳结果凝胶电泳的结果如图1所示。对比Marker可知，未发酵豆清多肽在20~31kDa以及31~45kDa之间出现条带，但大部分成弥散状态，这可能是制备豆腐的过程中大豆的浸泡时间较长，大豆的内源蛋白酶对其蛋白质的分解作用相关[19]，而发酵过后的豆清多肽没有条带，说明发酵对蛋白质有降解作用，发酵过后多肽的相对分子质量减小，这与刘丽莎等[20]的研究结果相似。图1发酵与未发酵SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳结果图
【参考文献】：
期刊论文
[1]一株产广谱细菌素乳酸菌的筛选与鉴定[J]. 赵天宇,郭一柯,刘霁逸,庞茂达. 食品研究与开发. 2018(23)
[2]连翘内生真菌的分离鉴定及其发酵液抑菌活性和HPLC测定[J]. 牛明福,杜梦璇,范逸文,李阳,刘永慧,布青云,朱凯阳,陈济斌. 天然产物研究与开发. 2018(04)
[3]利用正交实验优化豆清液的发酵条件[J]. 孙丰婷,张琛. 中国调味品. 2017(11)
[4]燕麦β-葡聚糖-大豆分离蛋白抑菌活性研究[J]. 唐艳红,罗双群,张明玉. 粮食与油脂. 2017(03)
[5]豆清液综合利用研究进展[J]. 孔彦卓,尹乐斌,雷志明,朱朋艳,杨莹,赵良忠. 现代农业科技. 2017(01)
[6]利用豆腐黄浆水发酵红曲色素的研究[J]. 王薇,马波,许云华,邵世光,吴华华. 中国调味品. 2017(01)
[7]豆腐黄浆水蛋白制备鲜味基料工艺的研究[J]. 孙绮遥,赵忠良,郭顺堂. 食品工业. 2016(10)
[8]分步酶解法制备黄浆水活性肽[J]. 刘丽莎,彭义交,任丽,田旭,白洁,吕晓莲,陶国琴,郭宏. 中国酿造. 2015(10)
[9]双菌发酵黄浆水制备豆腐凝固剂培养条件优化[J]. 吕博,黎晨晨,刘宁,李健. 食品工业科技. 2015(02)
[10]黄浆水醋酿制工艺研究[J]. 邓丽华,梁钰莹,周红丽,蒋立文,唐小娟. 核农学报. 2014(05)
硕士论文
[1]四个中国大豆品种发芽过程营养成分消长变化规律[D]. 李倩倩.中国农业科学院 2017
[2]产广谱细菌素乳酸菌的筛选及其细菌素特性、发酵条件的研究[D]. 滕志利.大连工业大学 2013
[3]羟基自由基的测定及活性氧自由基在极谱络合波中的增敏作用研究[D]. 邰超.首都师范大学 2002
本文编号：3491375
【文章来源】：食品工业. 2020,41(10)北大核心
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
不同超滤条件对样品DPPH清除活性表1不同超滤条件发酵与未发酵DPPH清除效果EC50值
0.01b5.06±0.03d3.75±0.02h3.52±0.01k4.46±0.00f未发酵4.58±0.02e6.80±0.01a5.13±0.04c3.69±0.03i3.94±0.04g注:不同字母表示差异显著(p＜0.05)2.2.2不同超滤组分对ABTS自由基清除效果比较2,2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐，与过二硫酸钾反应，生成绿色的ABTS自由基，在734nm处有特征吸收峰，当ABTS溶液与具有抗氧化活性的物质反应时，体系颜色降低，在734nm处的吸光度降低，由于其反应灵敏、操作简单，也经常被用作体外抗氧化活性的评定标准[23]。如图3所示，从不同超滤组分分析，在800Da~3kDa相对分子质量范围内的样品表现出较强的ABTS自由基清除活性，比同类型其他组分样品清除活性强，但同一类型（发酵和未发酵）不同超滤组分之间对ABTS清除能力强弱没有发现规律。比较同一组分发酵和未发酵超滤样品的清除活性可以得出，经过发酵部分组分的清除效果有所提高（＞10kDa，3~5kDa和＜800Da），但是5~10kDa和800Da~3kDa组分样品发酵和未发酵的EC50值没有显著差异（p＞0.05），见表2。图3不同超滤条件对样品ABTS清除活性表2不同超滤条件发酵与未发酵ABTS清除效果EC50值不同超滤膜EC50/(mg·mL-1)＞10kDa5~10kDa3~5kDa800Da~3kDa＜800Da发酵1.21±0.02e0.92±0.01f1.21±0.02e0.86±0.01g1.32±0.01d未发酵1.94±0.01a0.92±0.01f1.37±0.01c0.86±0.03g1.66±0.02b注:不同字母表示差异显著(p＜0.05)2.2.3不同超滤组分对OH自由基清除效果的比较OH自由基是生物体内最重要的活性氧自由基之一，是活性氧中对生物体毒性最强，危害最大的一种自由基，与细胞辐射损伤、肿瘤、衰老等密切相关[24-25]
作，在培养基表面垂直放上牛津杯（内短6mm、外径8mm、高10mm），轻轻加压，使其与培养基接触无空隙，在杯中加入100μL豆清多肽的不同超滤组分样品，勿使其外溢，每个样品重复3次[18]，在37℃培养箱中培养24h，观察抑菌圈大小，采用全自动菌落分析仪，测量每个培养皿中抑菌圈的直径，取平均值。无菌水作为空白对照[16-17]。1.4数据处理试验数据运用Origin9.0进行处理分析，运用SPSS软件进行统计分析，每组试验平行3次，取平均值。2结果与分析2.1发酵与未发酵SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳结果凝胶电泳的结果如图1所示。对比Marker可知，未发酵豆清多肽在20~31kDa以及31~45kDa之间出现条带，但大部分成弥散状态，这可能是制备豆腐的过程中大豆的浸泡时间较长，大豆的内源蛋白酶对其蛋白质的分解作用相关[19]，而发酵过后的豆清多肽没有条带，说明发酵对蛋白质有降解作用，发酵过后多肽的相对分子质量减小，这与刘丽莎等[20]的研究结果相似。图1发酵与未发酵SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳结果图
【参考文献】：
期刊论文
[1]一株产广谱细菌素乳酸菌的筛选与鉴定[J]. 赵天宇,郭一柯,刘霁逸,庞茂达. 食品研究与开发. 2018(23)
[2]连翘内生真菌的分离鉴定及其发酵液抑菌活性和HPLC测定[J]. 牛明福,杜梦璇,范逸文,李阳,刘永慧,布青云,朱凯阳,陈济斌. 天然产物研究与开发. 2018(04)
[3]利用正交实验优化豆清液的发酵条件[J]. 孙丰婷,张琛. 中国调味品. 2017(11)
[4]燕麦β-葡聚糖-大豆分离蛋白抑菌活性研究[J]. 唐艳红,罗双群,张明玉. 粮食与油脂. 2017(03)
[5]豆清液综合利用研究进展[J]. 孔彦卓,尹乐斌,雷志明,朱朋艳,杨莹,赵良忠. 现代农业科技. 2017(01)
[6]利用豆腐黄浆水发酵红曲色素的研究[J]. 王薇,马波,许云华,邵世光,吴华华. 中国调味品. 2017(01)
[7]豆腐黄浆水蛋白制备鲜味基料工艺的研究[J]. 孙绮遥,赵忠良,郭顺堂. 食品工业. 2016(10)
[8]分步酶解法制备黄浆水活性肽[J]. 刘丽莎,彭义交,任丽,田旭,白洁,吕晓莲,陶国琴,郭宏. 中国酿造. 2015(10)
[9]双菌发酵黄浆水制备豆腐凝固剂培养条件优化[J]. 吕博,黎晨晨,刘宁,李健. 食品工业科技. 2015(02)
[10]黄浆水醋酿制工艺研究[J]. 邓丽华,梁钰莹,周红丽,蒋立文,唐小娟. 核农学报. 2014(05)
硕士论文
[1]四个中国大豆品种发芽过程营养成分消长变化规律[D]. 李倩倩.中国农业科学院 2017
[2]产广谱细菌素乳酸菌的筛选及其细菌素特性、发酵条件的研究[D]. 滕志利.大连工业大学 2013
[3]羟基自由基的测定及活性氧自由基在极谱络合波中的增敏作用研究[D]. 邰超.首都师范大学 2002
本文编号：3491375
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