高效液相色谱测定小米中叶酸含量方法优化

发布时间：2021-11-25 06:33

　　针对目前小米中叶酸提取及测定方法研究较少,尤其是对适用于规模化提取、测定叶酸含量的研究不够深入的问题,采用高效液相色谱法对小米中叶酸含量进行测定。对影响叶酸提取及测定效果的三酶法和高效液相色谱法进行单因素试验和响应面优化。结果表明:小米中叶酸提取的最佳条件为,提取液添加量1 mL,淀粉酶20μL,蛋白酶150μL,大鼠血清25μL;最佳测定条件为,流速1mL/min,流动相pH=7,检测波长280nm、色谱柱柱温30℃。使用优化后的三酶法和高效液相色谱法对小米中叶酸进行提取并测定,测定过程中重复性的相对标准偏差（RSD）为0.50%。综上,三酶法和高效液相色谱法是一种可用于大规模高效提取并精确定量小米中叶酸含量的方法。 

【文章来源】：中国农业大学学报. 2020,25(12)北大核心CSCD

【文章页数】：11 页

【部分图文】：

各提取因素对小米中叶酸质量分数测定值的影响

提取液添加量（A1）、α-淀粉酶添加量（B1）、蛋白酶添加量（C1）和大鼠血清添加量（D1）交互作用对小米中叶酸质量分数测定值（Y）影响见图2。响应面坡度越陡峭，等高线越扁，且排列越密集，说明Y对各因素变化敏感，影响显著。由图2可知，A1C1、A1D1响应面曲线陡峭、相应底部的等高线较为密集，呈马鞍形，说明两因素之间交互作用显著，这与显著性分析结果相符。A1B1响应面对应的等高线接近圆形，表明A1B1交互作用对Y的影响不显著。B1C1、B1D1、C1D1响应面曲面较平缓，表明B1和C1、B1和D1、C1和D1交互作用对Y的影响不显著。2.2.3 最佳提取因素的确定和验证

HPLC法测定条件对小米中叶酸质量分数测定值的影响见图3。流速为1mL/min时，小米中叶酸质量分数测定值较大为2.19μg/g（图3(a））。流动相pH为6.5时，小米中叶酸质量分数测定值最大为2.24μg/g（图3(b））。小米叶酸的最大吸收波长为280nm（图3(c））。在试验设置水平范围内，柱温为30℃时，叶酸质量分数测定值较大为2.25μg/g（图3(d））。因此，选取流速1 mL/min、流动相pH=6.5、波长280nm和柱温30℃进行响应面优化试验。2.4 HPLC法测定条件响应面优化

【参考文献】：
期刊论文
[1]HPLC法测定谷子籽粒叶酸含量及种质资源评价[J]. 侯思宇,宋敏,闫陆飞,孙朝霞,韩渊怀,李红英.  土壤. 2018(06)
[2]微生物法测定大米中叶酸含量的研究[J]. 赵平,郭莹莹,杨光,王哲明,丁松乔.  现代食品. 2018(20)
[3]大豆叶酸的三酶法提取及微生物检测技术研究[J]. 孟繁磊,张玲,张原宇,马虹.  粮食与饲料工业. 2016(12)
[4]婴幼儿辅食营养补充品中叶酸的测定方法[J]. 罗敏婷,吴克刚,黄伟乾.  食品与机械. 2016(09)
[5]作物叶酸生物强化[J]. 姜凌,张春义.  生命科学. 2015(08)
[6]超高效液相串联质谱测定四棱豆中总叶酸和多聚谷氨酸叶酸的含量[J]. 戴金凤,徐明芳,段翰英,邱瑞霞,王超.  现代食品科技. 2015(10)
[7]微生物法快速检测婴幼儿配方乳粉中叶酸含量[J]. 张慧,吴环,黄伟乾,刘冬虹,冼燕萍,郭新东,叶梅,万渝平.  食品研究与开发. 2015(05)
[8]粮食及果蔬中叶酸含量分析[J]. 邵丽华,王莉.  食品科学. 2014(24)
[9]山西谷子资源叶酸含量分析及评价[J]. 邵丽华,王莉,白文文,刘雅娟.  中国农业科学. 2014(07)
[10]超高效液相色谱法测定保健食品中的多种水溶性维生素[J]. 蒲明清,戴舒春,张连龙,周华生,成恒嵩.  现代食品科技. 2012(07)

博士论文
[1]水稻籽粒叶酸含量QTL分析及生物强化[D]. 董薇.中国农业科学院 2011

硕士论文
[1]玉米叶酸代谢基因的生物信息和时空表达模式分析[D]. 连通.中国农业科学院 2016
[2]过量表达GCHI和ADCS基因对提高植物叶酸含量的研究[D]. 汪冉冉.兰州大学 2013



本文编号：3517595