人巨细胞病毒pp65DNA疫苗免疫小鼠的研究

发布时间：2024-06-30 12:14

　　目的 以从HCMV AD 169株扩增出pp65抗原克隆至真核载体而制备的pp65 DNA疫苗免疫小鼠，观察其诱导Balb／c小鼠产生的体液免疫和细胞免疫应答，以及细胞因子的变化，来证明该疫苗是否具高度免疫性和低毒副作用。对预防和治疗HCMV感染，特别是防治孕妇和育龄夫妇HCMV感染，预防神经残疾儿的出生具有重要意义。方法将24只健康Balb／c小鼠随机分成A、B及C三组，每组8只。A组(对照组)：0、2、4周分别于左后腿股四头肌注入生理盐水；B组(实验组 1)：0、2、4周分别于左后腿股四头肌注入200 ug pp65 DNA疫苗；C组(实验组 2)：0、2、4周分别于左后腿股四头肌注入200 ug pp65 DNA加佐剂CpG ODN 10 ug。免疫前3天小鼠接种部位注射0.5mg／ml盐酸布比卡因50 ul进行预处理，于免疫后第三周断尾采血，收集血清，末次免疫1周后摘眼球采血，其中0.1ml加EDTA抗凝，余收集血清，间接ELISA法检测各组小鼠血清中的pp65抗体效价；使用间接免疫荧光法，用流式细胞仪对CD3⁺、CD4⁺及CD8<...

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图1:各组免疫小鼠血清的特异性抗体效价

小鼠血清图1:各组免疫小鼠血清的特异性抗体效价Figurel:TitersofthesPeeifieantibodyagainstH日脚PP65m1CeInSerUm-3.2.2特异性体液免疫将B与C组小鼠血清抗体效价的倒数取对数后进行t检验，见表3:表3:特异性体液免疫(王始)....

图3Fig3各组免疫小鼠的cD4+T淋巴细胞百分率

geofspleenCDS+Tlymphoeytesineaeh盯oup89曰︸匕9自g.9图Fi八匕图3Fig3各组免疫小鼠的cD4+T淋巴细胞百分率PereentageofspleenCD4+Tlylnphoeytesineaeh盯oup3.4细胞因子l卜2检测结果用放射免疫....

图4各组免疫小鼠第七周血清IL一2的含量

PereentageofspleenCD4+Tlylnphoeytesineaeh盯oup3.4细胞因子l卜2检测结果用放射免疫法测得免疫小鼠血清IL一2结果见表5及图4:

图5:各组免疫小鼠第七周血清IFN一Y的含量

5小鼠血清细胞因子!FN一丫检测结果:各组鼠血清测得的IFN一YOD值扣除空白对照on值之后，在标准曲线上查出其含量，见表6及图5:表6:免疫小鼠血清IFN一丫的浓度(pg/m1，王匀)Tab6:TheeoneentrationofIFN一Yinserumofinnnunized....

本文编号：3998728