基于HCN通道胞内调控机制的探究及小分子抑制剂的发现

发布时间：2024-03-17 10:43

　　研究背景超极化激活环核苷酸门控阳离子通道(HCN通道)属于电压门控型离子通道超家族,具有独特的电生理功能。在哺乳动物体内,HCN通道共有4个亚型,HCN1-HCN4,不同亚型HCN通道广泛分布于心血管和神经系统并参与不同的生理过程。阐明胞内信号通路调控HCN通道的作用机制和新型抑制剂的发现对于解析通道功能和靶向HCN通道的药物开发具有重要的意义。磷脂酰肌醇4.5-二磷酸(PIP2)是最重要的膜磷脂之一,主要分布在胞膜上,其水平可被多种受体和胞内信号通道调节。近年研究表明,PIP2调节多类离子通道功能,本课题的研究内容之一为探索PIP2及其下游信号通路PI3K/PIP3是否调控HCN通道功能;此外,HCN通道在控制心脏和神经系统中的起搏活动中起关键作用,因此,HCN通道已成为开发治疗心绞痛,疼痛和癫痫药物的新靶点,本课题另一方面的研究内容是针对系列候选化合物进行筛选,旨在寻找作用更强,亚型选择性更优的新型HCN通道抑制剂。研究目的1)探究PIP2对HCN通道的调控作用。2)探究PIP2下游信号通路PI3K/PIP3对HCN通道功能的影响。3)系列新型HCN通道抑制剂的发现。研究方法1)将...

【文章页数】：84 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２?ＨＣＮ通道的电生理特性［１９］??Ｆｉｇｕｒｅ?２?Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ?ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ?ｏｆ?ＨＣＮ?ｃｈａｎｎｅｌｓ??

与多数Ｋｖ通道截然不同，主要表现在以下三方面：（１）超极化激活：与多数电??压门控通道在膜电位去极化时被激活不同，ＨＣＮ通道在细胞处于静息膜电位（约??－５５?ｍＶ）以下时被激活，且当细胞膜进一步超极化则电流被进一步激活（图２?Ａ）；??（２）非选择性阳离子通道：尽管ＨＣＮ通道在....

图６?Ｋｉｒ通道Ｃ－端氨基酸序列对比分析［６５］??Ｆｉｇｕｒｅ?６?Ａｌｉｇｎｍｅｎｔ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｐｒｏｘｉｍａｌ?Ｃ－ｔｅｒｍｉｎａｌ?ｒｅｇｉｏｎ?ｏｆ?Ｋｉｒ?ｃｈａｎｎｅｌｓ??

前言??ＩＰ２带负电荷的磷酸盐基团，因此可能使得其与离子通道末端残基之间直接相互作用进而有利于离子通道的激活。ｒ３．１和Ｋｉｒ３．２通道所制备的Ｃ－末端融合蛋白可以直接与ＰＩＰ猜测。而且在Ｋｋ２．１中，Ｃ－末端已经鉴定了大量的ＰＩＰ２１８７，Ｋ１８８，Ｒ１８９）?［６２］。从所有....

图７?ＰＩＰ２介导ＨＣＮ通道门控不受ｃＡＭＰ影响［６７］??Ｆｉｇｕｒｅ?７?ＰＩＰ２－Ｍｅｄｉａｔｅｄ?Ｓｈｉｆｔ?ｉｎ??

碩士学位论文??通道更容易打开［６６＿６８］，而且该调控效应是显著的并且独立于ｃＡＭＰ的调控，即??ｃＡＭＰ的存在与否并不影响ＰＩＰ２对ＨＣＮ通道的调控作用（图７）。因此，猜测ＰＩＰ２??与ＨＣＮ通道的结合位点主要在ＨＣＮ通道的跨膜结构域及其连接部位之间，而不??是对于ｃＡＭＰ依....

图８?ＰＩＰ２调控ＨＣＮ通道参与节律活动［６７＇６８］??

而相对应的，利用穿孔膜片钳记录中脑多巴胺祌经元的自发放电频率发现，??ＰＩＰ２抑制剂Ｗｏｒｔｍａｒｍｉｎ阻断ＰＩＰ２的合成后，神经元的自发放电频率被抑制，而且，??ＨＣＮ通道的电压激活曲线显著往超极化方向移动（图８）。??１１??

本文编号：3930910