蓝萼甲素对人宫颈癌裸鼠移植瘤的作用及机制研究

发布时间：2017-08-05 20:28

  本文关键词：蓝萼甲素对人宫颈癌裸鼠移植瘤的作用及机制研究

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【摘要】：背景宫颈癌的发病率和死亡率在发展中国家女性疾病中居首位,严重威害着广大女性的健康。近年来随着中药提取条件的提高,开发高效低毒的中药在宫颈癌的治疗中成为大多数学者研究的热点。蓝萼甲素是一种具有广泛药理活性的二萜类化合物,对多种肿瘤细胞均有抑制作用,但关于蓝萼甲素抗宫颈癌在体的研究国内外尚无文献报道。目的在裸鼠体内构建宫颈癌HeLa细胞移植瘤的模型,模拟宫颈癌在人体内的生存环境,通过移植瘤生长抑制试验,来研究不同浓度的蓝萼甲素作用后对在体宫颈癌裸鼠移植瘤的抑制作用；同时研究不同浓度蓝萼甲素作用后移植瘤组织中p53和Bax在蛋白及其基因水平的表达,来探讨蓝萼甲素抑制宫颈癌可能的机制,为蓝萼甲素在临床上的应用提供动物实验依据。方法将体外培养的宫颈癌HeLa细胞皮下注射于裸鼠,从而构建宫颈癌移植瘤的模型,待移植瘤体积约为0.20cm3时,把15只荷瘤鼠随机分为4组。荷瘤鼠处死前眼球取血检测生化指标和肿瘤标志物,观察各组荷瘤鼠生化指标和肿瘤标志物的变化。通过移植瘤生长抑制试验、移植瘤组织HE染色、TUNEL法观察各组移植瘤的大体形态、组织学形态、细胞凋亡的情况；通过免疫组化、Western blot和]RT-PCR分析不同浓度蓝萼甲素作用后移植瘤组织中p53和Bax在蛋白及基因水平的表达变化。结果1.裸鼠成瘤率为100%。2.荷瘤鼠的生化指标和肿瘤标志物的结果表明,不同浓度的蓝萼甲素组和生理盐水对照组的肌酐、尿素氮、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、白细胞的差异均无统计学意义(P0.05)。各组荷瘤鼠的癌抗原及癌胚抗原随蓝萼甲素浓度的增加逐渐降低,各组比较差异有显著统计学意义(P0.05)。3.宫颈癌HeLa细胞移植瘤生长抑制实验表明,移植瘤的体积及移植瘤的重量随蓝萼甲素浓度的增加而逐渐被抑制,组间比较差别有统计学意义(P0.01)4.移植瘤组织形态观察表明,移植前HeLa细胞形态和移植后移植瘤组织结构形态相似,表明移植瘤的生物学特性近似人宫颈癌。5. TUNEL的结果表明,蓝萼甲素可诱导移植瘤细胞的凋亡,随蓝萼甲素浓度的增加凋亡细胞数逐渐增加,组间比较差别有统计学意义(P0.01)。6.免疫组化、Western blot、RT-PCR的结果表明,随蓝萼甲素浓度的增加p53和Bax在蛋白及基因水平的表达逐渐增强,组间比较差别有统计学意义(P＜0.01)。结论1.蓝萼甲素对人宫颈癌HeLa细胞裸鼠皮下移植瘤的生长有抑制作用,并有诱导移植瘤细胞的凋亡和降低荷瘤鼠肿瘤标志物的作用,有浓度的依赖性。2.蓝萼甲素可能通过诱导抑癌基因p53和促凋亡因子Bax的表达,从而抑制宫颈癌的增殖和促进其凋亡。
【关键词】：宫颈癌 蓝萼甲素 裸鼠移植瘤 p53 Bax
【学位授予单位】：新乡医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.33
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-12
• 材料与方法12-27
• 结果27-41
• 讨论41-44
• 小结44-45
• 参考文献45-50
• 综述：中药对宫颈癌治疗的研究进展50-61
• 参考文献56-61
• 附录61-62
• 攻读学位期间发表文章情况62-63
• 致谢63-64
• 个人简历64

【参考文献】

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本文编号：626829