桑葚中花青素的抗氧化活性及与牛血红蛋白间相互作用研究

发布时间：2023-11-24 18:50

　　本文提出了一种微乳萃取-响应界面的新方法,并通过超声辅助溶剂浸提法,首次应用于桑葚中花青素的纯化。系统研究了经纯化后的桑葚中花青素的抗氧化效果、三种体系的热降解规律等,并将花青素与药物混合后进行包裹,提高了花青素的稳定性。探索了在不同pH条件下,不同浓度的花青素与牛血红蛋白的相互作用,体系粘度和电导率的变化规律。主要的研究内容为:1、桑葚中花青素的提纯优化结合胶体与界面化学和分离工程技术,将超声法辅助溶剂浸提法、响应面法、微乳液萃取法和柱层析法联用,对桑葚中的花青素的提纯工艺进行优化。可得到优化后溶剂组分中乙醇浓度为85.87%;以料液比1:6.3配制;乙醇与醋酸的比例设为3.9:1;以及优化后的外界因素为:在75℃下水浴浸提19分钟;设置的超声功率为125.4 W;超声时间设为29.6分钟;平衡时间设定为60.6分钟。优化后AB-8树脂分离的条件:温度设置为40℃;以60%乙醇浓度洗脱;控制pH值为6。根据优化后的条件得到的花青素粗产品,花青素类成分含有87.62%。在最佳条件下,用该方法对三种不同来源的桑葚样品进行了分析,江苏产地的桑葚品质最好。2、桑葚中花青素抗氧化活性研究研究了...

【文章页数】：98 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 天然色素
        1.1.1 天然色素的背景
        1.1.2 天然色素的影响因素
    1.2 桑葚概述
        1.2.1 桑葚的研究背景
        1.2.2 桑葚的成分
        1.2.3 桑葚在医药方面的功能作用
    1.3 桑葚红色素
        1.3.1 桑葚红色素的研究背景
        1.3.2 桑葚红色素的营养成分
        1.3.3 桑葚红色素的理化性质
        1.3.4 桑葚红色素的功能作用
    1.4 天然色素的研究现状
        1.4.1 溶剂提取法
        1.4.2 超临界流体萃取法
        1.4.3 超声波辅助萃取法
        1.4.4 微波辅助萃取法
        1.4.5 酶解提取法
        1.4.6 分子蒸馏法
        1.4.7 双水相萃取法
        1.4.8 微乳液萃取法
    1.5 本论文研究的主要内容、意义及创新点
        1.5.1 本论文研究的主要内容和意义
        1.5.2 本论文的创新点
    1.6 参考文献
第二章 桑葚中花青素提纯工艺的优化
    2.1 引言
    2.2 实验部分
        2.2.1 实验试剂药品及仪器
        2.2.2 样品处理
        2.2.3 花青素含量的计算方法
    2.3 实验方法
        2.3.1 溶剂组分的单因素试验
            2.3.1.1 酸化剂的确定
            2.3.1.2 乙醇浓度
            2.3.1.3 醋酸与乙醇的比例
            2.3.1.4 料液比
            2.3.1.5 响应面分析实验因素
        2.3.2 外界因素的单因素试验
            2.3.2.1 浸提温度
            2.3.2.2 浸提时间
            2.3.2.3 超声功率
            2.3.2.4 超声时间
            2.3.2.5 平衡时间
            2.3.2.6 响应面分析实验因素
        2.3.3 微乳液萃取花青素
        2.3.4 柱层析条件的影响
            2.3.4.1 四种树脂吸附率的测定
            2.3.4.2 四种树脂解吸率测定
            2.3.4.3 温度对吸附效果的影响
            2.3.4.4 pH值对吸附效果的影响
            2.3.4.5 洗脱剂浓度的影响
    2.4 结果与讨论
        2.4.1 溶剂组分的影响
            2.4.1.1 酸化剂的确定
            2.4.1.2 乙醇浓度
            2.4.1.3 醋酸和乙醇的比例
            2.4.1.4 料液比
            2.4.1.5 响应面优化结果
            2.4.1.6 等高线图及响应曲面图分析
            2.4.1.7 验证试验
        2.4.2 外界因素的影响
            2.4.2.1 水浴温度
            2.4.2.2 水浴时间
            2.4.2.3 超声时间
            2.4.2.4 超声功率
            2.4.2.5 平衡时间
            2.4.2.6 响应面优化结果
            2.4.2.7 等高线图及响应曲面图分析
            2.4.2.8 验证试验
        2.4.3 微乳萃取的影响
        2.4.4 柱层析条件对桑葚中花青素提取率的影响
            2.4.4.1 四种树脂吸附率效果
            2.4.4.2 四种树脂解析率效果
            2.4.4.3 温度对树脂的吸附效果
            2.4.4.4 pH值对AB-8树脂吸附效果
            2.4.4.5 洗脱剂浓度对洗脱效果的影响
        2.4.5 不同产地花青素品质比较
            2.4.5.1 实际样品测定及回收率
            2.4.5.2 线性及检出限
    2.5 本章小结
    2.6 参考文献
第三章 桑甚中花青素的抗氧化活性研究
    3.1 引言
    3.2 实验部分
        3.2.1 实验试剂
        3.2.2 实验仪器
        3.2.3 试剂及样品的制备
        3.2.4 实验方法
            3.2.4.1 总还原能力的测定
            3.2.4.2 DPPH自由基的测定
            3.2.4.3 羟基自由基清除能力
            3.2.4.4 脂质过氧化抑制能力
            3.2.4.5 热降解动力学研究
            3.2.4.6 扫描电子显微镜测量
            3.2.4.7 动态光散射测量
            3.2.4.8 包裹率的测定
            3.2.4.9 释放率的测定
            3.2.4.10 溶胀率的测定
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 总还原能力
        3.3.2 DPPH自由基清除能力
        3.3.3 羟基自由基清除能力
        3.3.4 脂质过氧化抑制能力
        3.3.5 热降解动力学研究
        3.3.6 利巴韦林/花青素-壳聚糖纳米球的制备
            3.3.6.1 花青素含量对利巴韦林/花青素-壳聚糖形态的影响
            3.3.6.2 壳聚糖含量对利巴韦林/花青素-壳聚糖纳米球形态的影响
            3.3.6.3 利巴韦林/花青素在纳米球中的包裹率
            3.3.6.4 利巴韦林/花青素在纳米球中的释放率
    3.4 本章小结
    3.5 参考文献
第四章 花青素与牛血红蛋白间相互作用
    4.1 引言
    4.2 实验部分
        4.2.1 实验试剂及仪器
        4.2.2 实验方法
            4.2.2.1 紫外光谱的测定
            4.2.2.2 荧光光谱的测定
            4.2.2.3 蛋白二级结构参数的测定
            4.2.2.4 溶液粘度的测定
            4.2.2.5 聚集形貌的表征
            4.2.2.6 电导率的测定
    4.3 结果与讨论
        4.3.1 花青素、利巴韦林以及牛血红蛋白的紫外荧光光谱图
        4.3.2 紫外光谱的变化
        4.3.3 荧光光谱的变化
        4.3.4 同步荧光光谱的变化
        4.3.5 花青素与牛血红蛋白相互作用的能量转移
        4.3.6 花青素浓度对混合体系的粘度的影响
        4.3.7 花青素对蛋白二级结构参数的影响
        4.3.8 花青素浓度对牛血红蛋白聚集形貌的影响
        4.3.9 花青素浓度对混合体系电导率的影响
        4.3.10 花青素、利巴韦林和牛血红蛋白相互作用研究
    4.4 本章小结
    4.5 参考文献
结论
致谢
硕士期间研究成果



本文编号：3866388