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基于组学技术分析山羊乳与牛乳乳清蛋白与脂肪球膜蛋白组成及消化特性

发布时间:2024-01-16 07:40
  乳中含有丰富的营养成分及生物活性物质,对新生哺乳动物的健康生长至关重要,同时乳也是成年人膳食中的一种重要蛋白质来源。山羊乳与牛乳是我国乳制品行业的主要消费乳源,目前牛乳的产量明显高于羊乳,占据乳品消费市场份额的大部分。随着对山羊乳营养价值及生物学功能了解的加深,山羊乳及其乳制品受到越来越多消费者的青睐,具有广阔的市场前景。但目前对山羊乳与牛乳中的蛋白质尤其是一些低丰度蛋白质的了解还不够全面。乳清蛋白与乳脂肪球膜(milk fat globule membrane,MFGM)蛋白虽然只占总乳蛋白的一小部分,但却具有丰富的生物学功能。本文利用定性及定量蛋白质组学技术对山羊乳与牛乳、山羊初乳与常乳中的乳清蛋白、MFGM蛋白进行了表征,并使用基因本体(Gene Ontology,GO)功能注释、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路、热图等生物信息学分析工具对山羊乳与牛乳、山羊初乳与常乳中乳清蛋白、MFGM蛋白的组成及功能特性进行了分析比较;建立婴儿体外消化模型,通过分析胃肠消化过程中山羊初乳与常乳的电位、粒径、...

【文章页数】:152 页

【学位级别】:博士

【文章目录】:
摘要
abstract
第1章 绪论
    1.1 乳蛋白概述
        1.1.1 酪蛋白
        1.1.2 乳清蛋白
        1.1.3 乳脂肪球膜蛋白
    1.2 蛋白质组学概述
        1.2.1 蛋白质组学
        1.2.2 蛋白质组学技术
        1.2.3 生物信息学分析
    1.3 乳蛋白质组学研究进展
        1.3.1 乳蛋白质组学
        1.3.2 乳清蛋白质组学研究进展
        1.3.3 乳脂肪球膜蛋白质组学研究进展
    1.4 本文研究目的、意义及研究内容
        1.4.1 本文研究目的
        1.4.2 本文研究意义
        1.4.3 本文研究内容及技术路线
第2章 山羊乳与牛乳乳清蛋白/乳脂肪球膜蛋白定性分析
    2.1 材料与设备
        2.1.1 试验材料
        2.1.2 试验设备
    2.2 试验方法
        2.2.1 样品预处理
        2.2.2 蛋白样品酶解
        2.2.3 纳升超高效液相色谱分离
        2.2.4 Orbitrap超高分辨质谱仪鉴定
        2.2.5 蛋白质的鉴定及生物信息学分析
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 乳清蛋白的鉴定
        2.3.2 乳清蛋白的生物信息学分析
        2.3.3 乳脂肪球膜蛋白的鉴定
        2.3.4 乳脂肪球膜蛋白的生物信息学分析
    2.4 本章小结
第3章 基于iTRAQ标记定量分析山羊乳与牛乳乳清蛋白/乳脂肪球膜蛋白
    3.1 材料与设备
        3.1.1 试验材料
        3.1.2 试验设备
    3.2 试验方法
        3.2.1 样品预处理
        3.2.2 蛋白样品酶解
        3.2.3 iTRAQ标记
        3.2.4 液质联用分析
        3.2.5 蛋白质的定量及生物信息学分析
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 乳清蛋白的定量
        3.3.2 乳清蛋白的生物信息学分析
        3.3.3 乳脂肪球膜蛋白的定量
        3.3.4 乳脂肪球膜蛋白的生物信息学分析
    3.4 本章小结
第4章 山羊初乳与常乳乳清蛋白/乳脂肪球膜蛋白定性分析
    4.1 材料与设备
        4.1.1 试验材料
        4.1.2 试验设备
    4.2 试验方法
        4.2.1 样品预处理
        4.2.2 蛋白样品酶解
        4.2.3 纳升超高效液相色谱分离
        4.2.4 Orbitrap超高分辨质谱仪鉴定
        4.2.5 蛋白质的鉴定及生物信息学分析
    4.3 结果与讨论
        4.3.1 乳清蛋白的鉴定
        4.3.2 乳清蛋白的生物信息学分析
        4.3.3 乳脂肪球膜蛋白的鉴定
        4.3.4 乳脂肪球膜蛋白的生物信息学分析
    4.4 本章小结
第5章 基于iTRAQ标记定量分析山羊初乳与常乳乳清蛋白/乳脂肪球膜蛋白
    5.1 材料与设备
        5.1.1 试验材料
        5.1.2 试验设备
    5.2 试验方法
        5.2.1 样品预处理
        5.2.2 蛋白样品酶解
        5.2.3 iTRAQ标记
        5.2.4 液质联用分析
        5.2.5 蛋白质的定量及生物信息学分析
    5.3 结果与讨论
        5.3.1 乳清蛋白的定量
        5.3.2 乳清蛋白的生物信息学分析
        5.3.3 乳脂肪球膜蛋白的定量
        5.3.4 乳脂肪球膜蛋白的生物信息学分析
    5.4 本章小结
第6章 山羊初乳与常乳体外消化特性的研究
    6.1 材料与设备
        6.1.1 试验材料
        6.1.2 试验设备
    6.2 试验方法
        6.2.1 模拟婴儿体外胃肠消化
        6.2.2 Zeta电位的测定
        6.2.3 粒径的测定
        6.2.4 SDS-PAGE电泳
        6.2.5 肽段的鉴定
        6.2.6 数据分析
    6.3 结果与讨论
        6.3.1 山羊初乳与常乳各消化样品Zeta电位的比较
        6.3.2 山羊初乳与常乳各消化样品粒径的比较
        6.3.3 山羊初乳与常乳各消化样品SDS-PAGE电泳结果分析
        6.3.4 基于蛋白质组学技术的肽段鉴定结果分析
    6.4 本章小结
第7章 结论
    7.1 全文总结
    7.2 展望
参考文献
作者简介及科研成果
致谢



本文编号:3878840

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