芝麻内源性蛋白酶系的鉴定、水解条件及其在油体破乳中的应用研究

发布时间：2024-03-25 05:14

　　水酶法由于在环保以及脂质和蛋白质综合利用方面的优势,越来越受到关注。但是水酶法需要外加商业蛋白酶,增加了加工成本。本实验室的前期研究发现,芝麻浆离心所得到的上浮乳状液(油体富集物)中含有活性较强的内源性蛋白酶,具有代替商业蛋白酶制剂来酶解芝麻油体富集物制油的潜力。但是,目前对于这些内源性蛋白酶的水解条件还没有系统研究。基于此,本研究的思路如下:首先考察离心分离前的预处理对于脂质和蛋白质分离效果的影响,再系统考察了油体富集物中内源性蛋白酶的种类及其水解条件,最后考察内源性蛋白酶对于油体富集物破乳制油的作用效果。首先,探究了芝麻浆液的制备及其离心分离的工艺条件。结果表明,三次打浆可以使得芝麻中90%以上的脂质、87%的蛋白质和89%的固形物进入浆液。当浆液调节pH至8.0,离心可使浆液中80%的脂质和7%的蛋白质分布于油体富集物中。其次,对油体富集物中的内源性蛋白酶系进行了鉴定,并考察了水解pH范围和温度范围。LC-MS/MS以及二维电泳和MALDI-TOF/TOF-MS联用的检测结果表明,油体富集物中含有多种内源性蛋白酶,包括内肽酶和外肽酶:内肽酶包括7种天冬氨酸蛋白酶,2种丝氨酸蛋白酶...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-1油体结构示意图

江南大学硕士学位论文2酰丝氨酸占22.1%。图1-1油体结构示意图。油体钙蛋白和油体固醇蛋白在本图中没有显示。Fig.1-1Thestructuremodelofoilbody.Caleosinandsteroleosinarenotshowninthisfigure.如图1-1....

图1-2油质蛋白结构示意图

江南大学硕士学位论文2酰丝氨酸占22.1%。图1-1油体结构示意图。油体钙蛋白和油体固醇蛋白在本图中没有显示。Fig.1-1Thestructuremodelofoilbody.Caleosinandsteroleosinarenotshowninthisfigure.如图1-1....

图2-1不同pH提取的油体富集物的制备流程图

2材料与方法9水，以18000r/min打浆2min后过滤，取渣加入2M去离子水，以18000r/min打浆1min后过滤，取渣再加入2M去离子水，以18000r/min打浆1min后过滤，合并三次滤液。上述提到的M的单位均为g。2.3.2盐和pH对脂质和蛋白质分离的影响2.3.....

图2-2油体富集物制备流程图

2材料与方法11份调节pH至9.0；分别添加AEBSF和PepstatinA，AEBSF的浓度为0、0.5和1.0mmol/L，PepstatinA的浓度为0、2和4μmol/L。而后将OB-1稀释液置于60oC，OB-2和OB-3稀释液置于50oC，分别在0、1、3h取样，进行....

本文编号：3938589