RNA干扰HAS2基因表达对多囊卵巢综合征大鼠卵巢颗粒细胞生物学特性及免疫因子的影响

发布时间：2024-07-05 01:30

　　目的:探讨透明质酸合成酶2(HAS2)基因在多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠表达及RNA干扰其表达对卵巢颗粒细胞活力、凋亡及免疫抑制因子TGF-β1和VEGF表达的影响。方法:建立DHEA致雌性SD大鼠PCOS模型,Western blot检测PCOS大鼠卵巢组织中HAS2的蛋白表达;培养原代PCOS大鼠卵巢颗粒细胞,将合成的靶向抑制HAS2表达的siRNA转染到细胞中,Western blot检测转染效果及转染后48 h各组细胞中免疫抑制因子TGF-β1、VEGF和NF-κB信号通路相关蛋白的表达。CCK8及流式细胞仪分别检测细胞活力和凋亡率。结果:HAS2在PCOS大鼠卵巢组织中高表达,转染si-HAS2的大鼠卵巢颗粒细胞中HAS2的表达显著低于NC组和对照组(P <0. 05);与NC组比较,si-HAS2组细胞活力显著降低,凋亡率增加,TGF-β1、VEGF及NF-κB信号通路p-NF-κB、p-IκBα和下游cyclin D1、survivin的蛋白表达均显著降低(P <0. 05)。结论:HAS2在PCOS大鼠卵巢组织中高表达,抑制大鼠卵巢颗粒细胞中HAS2表达可...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 PCOS大鼠模型卵巢组织采集
        1.2.2 Western blot检测两组卵巢组织中HAS2的表达
        1.2.3 卵巢颗粒细胞的获取
        1.2.4 分组及siRNA转染
        1.2.5 CCK8检测细胞活力
        1.2.6 流式细胞仪检测凋亡
        1.2.7 TGF-β1、VEGF、p-NF-κB、p-IκB、cyclin D1和survivin蛋白表达检测
    1.3 统计学方法
2 结果
    2.1 HAS2在PCOS大鼠卵巢组织的表达
    2.2 si-HAS2转染大鼠卵巢颗粒细胞的效果
    2.3 si-HAS2转染对大鼠卵巢颗粒细胞活力及凋亡的影响
    2.4 si-HAS2转染对大鼠卵巢颗粒细胞免疫因子表达的影响
    2.5 si-HAS2转染对大鼠卵巢颗粒细胞NF-κB信号通路的影响
3 讨论



本文编号：4000826