miR-122靶向调控CREB1对膀胱癌细胞增殖、侵袭能力的影响及其分子机制

发布时间：2024-06-14 19:18

　　目的观察微小RNA122(miR-122)通过靶向调控环磷腺苷效应元件结合蛋白1(CREB1)对膀胱癌细胞增殖和侵袭能力的影响,并探讨其可能的作用通路。方法 Target Scan7.1软件预测程序显示,miR-122与CREB1启动子区存在连续的结合位点,双荧光素酶基因报告实验结果显示,在膀胱癌J82细胞中miR-122可靶向负调控CREB1。将J82细胞分为三组,共转染组采用LipofectamineTM2000转染miR-122 mimic及CREB1过表达质粒,miR-122 mimic组转染miR-122 mimic,对照组转染对照质粒,转染48 h。采用MTS法和平板克隆实验检测细胞增殖能力(分别以增殖OD值和克隆形成数表示),Transwell小室实验检测细胞侵袭能力(以穿膜细胞数表示),Western blotting法检测细胞CREB1及蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt (p-Akt)、雷帕霉素靶蛋白(m TOR)、磷酸化m TOR(p-mTOR)蛋白表达。结果与对照组比较,miR-122 mimic组和共转染组细胞增殖OD值、克隆形成数、穿膜细胞数均降低,且miR...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 miR-122与CREB1的靶向调控关系分析
    1.3 细胞培养及分组转染
    1.4 转染效果检测
    1.5 细胞增殖能力观察
    1.6 细胞侵袭能力观察
    1.7 细胞CREB1及Akt/m TOR信号通路相关蛋白表达检测
    1.8 统计学方法
2 结果
    2.1 双荧光素酶基因报告实验结果
    2.2 各组细胞miR-122、CREB1 mRNA表达比较
    2.3 各组细胞增殖、侵袭能力比较
    2.4 各组细胞CREB1及Akt/m TOR信号通路蛋白表达比较
3 讨论



本文编号：3994316