聚卟啉铁整体柱的制备及其色谱性能研究

发布时间：2017-06-18 19:04

  本文关键词：聚卟啉铁整体柱的制备及其色谱性能研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：作为细胞中的活性大分子,蛋白质是与疾病相关的主要分子,蛋白表达水平的改变与疾病直接相关。因此研究如何对蛋白质进行分离、鉴定,是一项具有重要意义的工作。整体柱具有制备方法简单、通透性好等特点,已被较广泛的用作高效液相色谱固定相,用于蛋白质的分离、分析中。本文通过两种聚合方式制备了两种聚卟啉铁整体柱,并分别以其为固定相,通过高效液相色谱法对几种标准蛋白质和几种实际生物样品进行了成功分离。首先,本文通过原位自由基聚合方式,以卟啉铁(Hemin)、甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)作为二元单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)作为交联剂,1,4-丁二醇、丙醇、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)为致孔剂,偶氮二异丁腈(AIBN)为引发剂,制备得到聚(Hemin-co-GMA-co-EDMA)整体柱。通过扫描电镜、红外光谱法、氮吸附-脱附法和压汞法等方法对得到的整体柱进行了表征。将该整体柱用作高效液相色谱的固定相,在8分钟内对三种标准蛋白进行了成功分离;此外,还分离了鸡卵清以及细胞色素C的酶解液,结果表明卟啉铁的加入增强了该整体柱对蛋白质的选择性,对实际蛋白质样品具有一定的分离能力。其次,为了改善整体柱孔结构的均匀性并提升其对蛋白质的选择性,采用活性-可控的原子转移自由基聚合法(atom transfer radical polymerization,ATRP)制备了聚(Hemin-co-GMA-co-EDMA)整体柱。利用该整体柱对几种标准蛋白进行了成功分离。此外,还分别对人血浆及蜗牛酶进行了分离。结果表明:与原位聚合得到的整体柱相比,通过ATRP方法制备得到的聚(Hemin-co-GMA-co-EDMA)整体柱具有均匀的孔结构和更好的蛋白选择性。
【关键词】：卟啉铁 高效液相 整体柱 蛋白质 原子转移自由基聚合
【学位授予单位】：河北大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R943
【目录】：

• 摘要5-6
• Abstract6-9
• 第1章 绪论9-13
• 1.1 蛋白质的分离、鉴定方法9-10
• 1.1.1 双向电泳（2-DE）-质谱技术9
• 1.1.2 毛细管电泳-质谱技术9
• 1.1.3 多维液相色谱-质谱技术9-10
• 1.2 聚合物整体柱10-12
• 1.2.1 聚合物整体柱的制备10-11
• 1.2.2 聚合物整体柱在蛋白质分离中的应用11
• 1.2.3 卟啉11-12
• 1.3 聚合物整体柱在蛋白分离中的问题及展望12-13
• 第2章 原位自由基聚合法制备聚（Hemin-co-GMA-co-EDMA）整体柱13-23
• 2.1 引言13
• 2.2 实验部分13-15
• 2.2.1 试剂与仪器13
• 2.2.2 整体柱的制备13-15
• 2.3 结果与讨论15-23
• 2.3.1 聚（Hemin-co-GMA-co-EDMA）整体柱的制备条件优化15
• 2.3.2 整体柱的内部结构特征15-16
• 2.3.3 聚（Hemin-co-GMA-co-EDMA）整体柱的红外光谱特征16-17
• 2.3.4 聚（Hemin-co-GMA-co-EDMA）整体柱的机械稳定性17-18
• 2.3.5 聚（Hemin-co-GMA-co-EDMA）整体柱的热稳定性及孔尺寸分布18-19
• 2.3.6 聚（Hemin-co-GMA-co-EDMA）整体柱的色谱表征19-23
• 第3章 聚（Hemin-co-GMA-EDMA）整体柱的ATRP法制备及其对蛋白质的分离23-33
• 3.1 引言23
• 3.2 实验部分23-25
• 3.2.1 试剂与仪器23-24
• 3.2.2 整体柱的制备24-25
• 3.3 结果与讨论25-33
• 3.3.1 聚（Hemin-co-GMA-co-EDMA）整体柱制备条件的优化25
• 3.3.2 整体柱的内部结构表征25-26
• 3.3.3 聚（Hemin-co-GMA-co-EDMA）整体柱的红外光谱特征26-27
• 3.3.4 聚（Hemin-co-GMA-co-EDMA）整体柱的机械稳定性27-28
• 3.3.5 聚（Hemin-co-GMA-co-EDMA）整体柱的热稳定性及孔尺寸分布28-29
• 3.3.6 聚（Hemin-co-GMA-co-EDMA）整体柱的色谱性能考察29-33
• 结论33-34
• 参考文献34-38
• 致谢38-39
• 攻读学位期间取得的科研成果39

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本文编号：460460