基于衍生化—微顺序注射光纤传感异丙酚分析

发布时间：2017-06-21 14:18

  本文关键词：基于衍生化—微顺序注射光纤传感异丙酚分析，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:建立异丙酚衍生化方法提高紫外或荧光检测灵敏度,应用于血浆中异丙酚分析时避免血浆中内源性物质的干扰。与微顺序注射-阀上实验室(μSI-LOV)、光纤传感技术相结合快速依次进行异丙酚的衍生化与检测,实现异丙酚快速、自动化、一体化分析。方法:1.异丙酚的衍生化及分析:研究异丙酚与4-磺酸基氯化重氮苯偶合衍生化,反应生成偶合产物用紫外可见分光光度法检测,通过单因素变量法对反应条件进行考察;研究丹磺酰氯(DNC-Cl)对异丙酚的荧光衍生化,反应后产物用荧光分光光度法测定,通过单因素变量法考察衍生化条件。建立基于重氮偶合衍生化-紫外可见分光光度法分析血浆中异丙酚并应用于异丙酚模拟生物样品分析。2.基于重氮偶合衍生-微顺序注射光纤传感异丙酚分析:将重氮偶合衍生化与μSI-LOV光纤传感相结合,在μSI-LOV系统中完成衍生化反应,产物通过光纤传感检测,用单因素变量法优化相关实验条件;建立重氮偶合衍生化结合μSI-LOV光纤传感分析血浆中异丙酚并应用于异丙酚模拟生物样品分析以及活体大鼠血浆中异丙酚分析。结果:1.异丙酚衍生化及分析:异丙酚重氮偶合衍生化后生成橙红色偶合产物,最大吸收波长(λmax)在483nm处,反应条件确定为:用0.06mol/L盐酸溶解对氨基苯磺酸并与亚硝酸钠反应5min生成浓度为5.780×10-4mol/L4-磺酸基氯化重氮苯再与异丙酚混合,加入浓度为0.7mol/L的氢氧化钠溶液,常温反应10min为最佳。偶合产物在20min内稳定;DNS-Cl对异丙酚荧光衍生化后产物激发和发射波长(λex、λem)分别位于345、500nm,衍生化条件确定为:乙腈作为DNS-Cl、异丙酚的溶剂,DNS-Cl与异丙酚摩尔比为8:1,加入0.1mol/mL氢氧化钠溶液,温度为60℃避光反应5min,产物需萃取,以环己烷为萃取溶剂萃取1min结果最佳,产物在10min内基本保持稳定;重氮偶合衍生化-紫外可见分光光度法分析血浆中异丙酚浓度范围在6~21μg/mL呈良好线性关系(r=0.9960),在高、中、低3个水平浓度平均方法回收率在102.9%~104.5%之间,精密度(RSD)4.1%~5.5%,方法重复性符合要求,并考察异丙酚前处理后在4小时内保持稳定。2.重氮偶合衍生结合μSI-LOV光纤传感分析异丙酚最优条件为:以50μL/s的流速顺序吸入50μL约1.156×10-3mol/L4-磺酸基氯化重氮苯溶液,50μL异丙酚溶液,40μL0.2mol/LNaOH溶液到储液管中无需停流,再反向以15μL/s流速打入流通池检测;重氮偶合衍生化结合μSI-LOV光纤传感分析血浆中异丙酚浓度范围在3~18μg/mL呈良好线性关系(r=0.9990),高、中、低3个浓度的平均方法回收率在89.8%~99.6%之间,精密度4.3%~5.4%,方法重复性符合要求,并考察异丙酚前处理后在4小时内保持稳定;该法可测得给药后10min内活体大鼠血浆中异丙酚含量,通过方法学验证测定血浆中异丙酚浓度范围在3~24μg/mL呈良好线性关系(r=0.9960),高、中、低3个浓度的平均方法回收率在92.7%~105.5%之间,精密度(RSD)5.3%~7.5%。结论:1.异丙酚重氮偶合衍生化后吸收波长红移、吸光度值增加,反应条件容易控制,反应速度快;DNS-Cl对异丙酚衍生化后λex、λem红移,荧光强度低,没用于血浆中异丙酚分析,提供考察结果为后续研究提供参考;重氮偶合衍生-紫外可见分光光度法可用于分析血浆中异丙酚,避免血中内源性物质干扰,方法简便、快捷。2.异丙酚重氮偶合衍生化结合μSI-LOV光纤传感,衍生化速率得到进一步改善,实现异丙酚分析过程的自动化、一体化。可用于血浆中异丙酚分析,该方法比重氮偶合衍生化结合紫外-可见分光光度法更快、更灵敏。该法用于测定活体大鼠血浆中异丙酚,灵敏度欠佳,方法还需进一步改善以分析更低浓度异丙酚。
【关键词】：异丙酚 荧光衍生 重氮偶合衍生 微顺序注射-阀上实验室 光纤传感
【学位授予单位】：新疆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R927
【目录】：

• 摘要8-10
• ABSTRACT10-13
• 前言13-15
• 研究内容15-51
• 1. 异丙酚衍生化及分析15-33
• 1.1 异丙酚重氮偶合衍生化15-21
• 1.2 丹磺酰氯对异丙酚荧光衍生化21-28
• 1.3 重氮偶合衍生-紫外可见分光光度法分析血浆中异丙酚28-33
• 2. 基于重氮偶合衍生-微顺序注射光纤传感异丙酚分析33-51
• 2.1 建立异丙酚重氮偶合衍生-微顺序注射光纤传感分析方法33-41
• 2.2 重氮偶合衍生-微顺序注射光纤传感分析血浆中异丙酚41-45
• 2.3 重氮偶合衍生-微顺序注射光纤传感分析活体大鼠血浆中异丙酚45-51
• 小结51-53
• 致谢53-54
• 参考文献54-60
• 综述60-71
• 参考文献65-71
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文71-72
• 导师评阅表72

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