前列腺素PGF 2α 和时钟基因Bmal1对鸡子宫上皮细胞前列腺素F受体基因表达的影响
发布时间：2024-04-06 17:00
昼夜节律影响动物多种生理过程,包括心血管系统功能、能量代谢、免疫、细胞再生和激素分泌。从生物节律变化角度,研究激素配体-受体和生物钟调控鸡子宫部前列腺素F受体基因(PTGFR)表达变化规律的成因,分析时钟基因和前列腺激素(PGF2α)对激素受体基因表达的影响,阐述时钟基因和PTGFR基因之间的潜在调控关系,具有重要科学意义。本研究以罗曼蛋鸡为材料,选择育成期和产蛋高峰时期鸡只,分析不同生理状态下子宫组织形态学变化规律。检测血液中前列腺素(PGs)、雌二醇(E2)、促卵泡素(FSH)和黄体生成素(LH)含量的动态变化和激素受体基因以及时钟基因表达量的变化规律。体外培养原代子宫上皮细胞,经免疫组化鉴定后为上皮细胞,测定细胞生长曲线;进行不同浓度梯度的激素处理,CCK8检测激素对子宫上皮细胞体外增殖的影响;并用siRNA干扰上皮细胞中核心时钟基因Bmal1,实时荧光定量检测时钟基因Bmal1和Per2、时控基因Rev-erb以及PGF2α激素受体基因PTGFR的表达水平,同时探索PGF2α对时钟基因表达的...
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩略词表
1 文献综述
1.1 雌禽性腺轴、繁殖器官及其功能
1.1.1 雌禽的下丘脑-垂体-性腺轴
1.1.2 雌禽的繁殖器官
1.1.3 禽类输卵管子宫部的组织结构
1.1.4 禽类输卵管子宫部的功能
1.2 鸡排卵与产蛋规律
1.2.1 蛋鸡的规律性排卵
1.2.2 蛋鸡产蛋的连续性
1.3 生物钟与时钟基因
1.3.1 生物节律
1.3.2 生物钟的核心组成单元
1.3.3 时钟基因调控生物节律的分子机制
1.4 性腺激素及其生理作用
1.4.1 促卵泡素FSH
1.4.2 黄体生成素LH
1.4.3 雌激素E2
1.5 前列腺素激素及其受体的研究进展
1.5.1 前列腺素PGs
1.5.2 前列腺素受体
1.6 本研究的目的意义和主要内容
1.6.1 研究的目的意义
1.6.2 研究的主要内容
2 材料与方法
2.1 试验材料
2.1.1 试验动物
2.1.2 试验试剂
2.1.3 常用试剂的配制
2.1.4 试验主要仪器设备
2.2 试验方法
2.2.1 血液激素的测定
2.2.2 子宫组织HE染色
2.2.3 组织中相关基因的荧光定量
2.2.4 子宫上皮细胞试验
2.3 数据分析
3 结果与分析
3.1 试验鸡只连产情况及试验材料筛选
3.2 鸡血液生殖激素含量及生殖激素受体基因的表达变化
3.2.1 血液四种生殖激素含量的昼夜变化
3.2.2 鸡生殖激素受体基因的昼夜表达变化
3.3 鸡育成期和产蛋期输卵管子宫部时钟基因的昼夜表达变化
3.4 鸡输卵管子宫组织的昼夜形态学变化
3.4.1 子宫组织的HE染色结果
3.4.2 子宫组织的昼夜形态学变化
3.5 鸡输卵管子宫部上皮细胞的培养和鉴定结果
3.5.1 鸡输卵管子宫部上皮细胞的培养结果
3.5.2 原代鸡子宫上皮细胞的免疫组化技术鉴定结果
3.6 前列腺素PGF2α和雌激素E2对鸡子宫上皮细胞增殖的影响
3.7 前列腺素PGF2α对鸡子宫上皮细胞前列腺素F受体蛋白表达的影响
3.8 前列腺素PGF2α对激素受体基因PTGFR和时钟基因表达的影响
3.9 干扰时钟基因Bmal1 对前列腺素受体基因PTGFR表达的影响
3.9.1 鸡子宫上皮细胞发条机制的建立
3.9.2 最佳干扰片段筛选结果
3.9.3 干扰时钟基因对子宫上皮细胞PTGFR基因表达的影响
4 讨论
4.1 蛋鸡育成期和产蛋高峰期生殖激素含量及激素受体表达量的变化
4.1.1 育成期和产蛋高峰期生殖激素含量变化
4.1.2 育成期与产蛋高峰期激素受体的表达量变化
4.2 蛋鸡育成期和产蛋高峰期时钟基因表达量变化
4.3 生殖激素对鸡子宫上皮细胞增殖和对时钟基因表达的影响
4.3.1 PGF2α和 E2对子宫上皮细胞增殖的影响
4.3.2 PGF2α激素处理对子宫上皮细胞中Bmal1和Per2 基因表达的影响
4.4 时钟基因对鸡子宫上皮细胞PTGFR基因表达的影响
5 结论
参考文献
致谢
作者简历
本文编号：3946914
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩略词表
1 文献综述
1.1 雌禽性腺轴、繁殖器官及其功能
1.1.1 雌禽的下丘脑-垂体-性腺轴
1.1.2 雌禽的繁殖器官
1.1.3 禽类输卵管子宫部的组织结构
1.1.4 禽类输卵管子宫部的功能
1.2 鸡排卵与产蛋规律
1.2.1 蛋鸡的规律性排卵
1.2.2 蛋鸡产蛋的连续性
1.3 生物钟与时钟基因
1.3.1 生物节律
1.3.2 生物钟的核心组成单元
1.3.3 时钟基因调控生物节律的分子机制
1.4 性腺激素及其生理作用
1.4.1 促卵泡素FSH
1.4.2 黄体生成素LH
1.4.3 雌激素E2
1.5.1 前列腺素PGs
1.5.2 前列腺素受体
1.6 本研究的目的意义和主要内容
1.6.1 研究的目的意义
1.6.2 研究的主要内容
2 材料与方法
2.1 试验材料
2.1.1 试验动物
2.1.2 试验试剂
2.1.3 常用试剂的配制
2.1.4 试验主要仪器设备
2.2 试验方法
2.2.1 血液激素的测定
2.2.2 子宫组织HE染色
2.2.3 组织中相关基因的荧光定量
2.2.4 子宫上皮细胞试验
2.3 数据分析
3 结果与分析
3.1 试验鸡只连产情况及试验材料筛选
3.2 鸡血液生殖激素含量及生殖激素受体基因的表达变化
3.2.1 血液四种生殖激素含量的昼夜变化
3.2.2 鸡生殖激素受体基因的昼夜表达变化
3.3 鸡育成期和产蛋期输卵管子宫部时钟基因的昼夜表达变化
3.4 鸡输卵管子宫组织的昼夜形态学变化
3.4.1 子宫组织的HE染色结果
3.4.2 子宫组织的昼夜形态学变化
3.5 鸡输卵管子宫部上皮细胞的培养和鉴定结果
3.5.1 鸡输卵管子宫部上皮细胞的培养结果
3.5.2 原代鸡子宫上皮细胞的免疫组化技术鉴定结果
3.6 前列腺素PGF2α和雌激素E2对鸡子宫上皮细胞增殖的影响
3.7 前列腺素PGF2α对鸡子宫上皮细胞前列腺素F受体蛋白表达的影响
3.8 前列腺素PGF2α对激素受体基因PTGFR和时钟基因表达的影响
3.9 干扰时钟基因Bmal1 对前列腺素受体基因PTGFR表达的影响
3.9.1 鸡子宫上皮细胞发条机制的建立
3.9.2 最佳干扰片段筛选结果
3.9.3 干扰时钟基因对子宫上皮细胞PTGFR基因表达的影响
4 讨论
4.1 蛋鸡育成期和产蛋高峰期生殖激素含量及激素受体表达量的变化
4.1.1 育成期和产蛋高峰期生殖激素含量变化
4.1.2 育成期与产蛋高峰期激素受体的表达量变化
4.2 蛋鸡育成期和产蛋高峰期时钟基因表达量变化
4.3 生殖激素对鸡子宫上皮细胞增殖和对时钟基因表达的影响
4.3.1 PGF2α和 E2对子宫上皮细胞增殖的影响
4.3.2 PGF2α激素处理对子宫上皮细胞中Bmal1和Per2 基因表达的影响
4.4 时钟基因对鸡子宫上皮细胞PTGFR基因表达的影响
5 结论
参考文献
致谢
作者简历
本文编号：3946914
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3946914.html